[发明专利]核酸扩增反应方法、核酸扩增反应装置以及核酸扩增反应用试剂在审
| 申请号： | 201710191715.3 | 申请日： | 2017-03-28 |
| 公开（公告）号： | CN107236789A | 公开（公告）日： | 2017-10-10 |
| 发明（设计）人： | 上原雅行 | 申请（专利权）人： | 精工爱普生株式会社 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12M1/00 |
| 代理公司： | 北京集佳知识产权代理有限公司11227 | 代理人： | 李洋,青炜 |
| 地址： | 日本*** | 国省代码： | 暂无信息 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 核酸 扩增 反应 方法 装置 以及 应用 试剂 | ||
1.一种核酸扩增反应方法，其中，
包含向包含核酸的扩增所使用的核酸扩增反应试剂的反应液施加用于使所述核酸扩增的热循环的工序，
在所述热循环中，退火反应以及伸长反应用的加热时间为1秒以上10秒以下，
所述核酸扩增反应试剂包含正向引物、反向引物、聚合酶以及荧光标志探针，
包含于所述反应液的所述正向引物的浓度为0.4μM以上3.2μM以下，
包含于所述反应液的所述反向引物的浓度为0.4μM以上3.2μM以下，
包含于所述反应液的所述聚合酶的量为0.5U以上4U以下，
包含于所述反应液的所述荧光标志探针的浓度为0.15μM以上1.2μM以下。
2.根据权利要求1所述的核酸扩增反应方法，其中，
所述核酸扩增反应试剂包含dNTP，
包含于所述反应液的所述dNTP的浓度为0.125mM以上1mM以下。
3.根据权利要求2所述的核酸扩增反应方法，其中，
所述正向引物的浓度为0.8μM以上3.2μM以下，
所述反向引物的浓度为0.8μM以上3.2μM以下，
所述聚合酶的量为1U以上4U以下，
所述荧光标志探针的浓度为0.3μM以上1.2μM以下，
所述dNTP的浓度为0.25mM以上1mM以下。
4.根据权利要求3所述的核酸扩增反应方法，其中，
所述正向引物的浓度为1.6μM以上3.2μM以下，
所述反向引物的浓度为1.6μM以上3.2μM以下，
所述聚合酶的量为2U以上4U以下，
所述荧光标志探针的浓度为0.6μM以上1.2μM以下，
所述dNTP的浓度为0.5mM以上1mM以下。
5.根据权利要求4所述的核酸扩增反应方法，其中，
所述正向引物的浓度为2.4μM以上3.2μM以下，
所述反向引物的浓度为2.4μM以上3.2μM以下，
所述聚合酶的量为3U以上4U以下，
所述荧光标志探针的浓度为0.9μM以上1.2μM以下，
所述dNTP的浓度为0.75mM以上1mM以下。
6.一种核酸扩增反应装置，其中，包括：
安装部，其能够安装核酸扩增反应用盒，所述核酸扩增反应用盒收容包含核酸的扩增所使用的核酸扩增反应试剂的反应液以及比重与所述反应液的比重不同且不与所述反应液混和的液体，并具有供所述反应液移动的流路；
温度梯度形成部，其在所述流路形成温度梯度；以及
移动机构，其以对所述反应液施加用于使所述核酸扩增的热循环的方式使所述反应液移动，
所述移动机构在所述热循环中，以退火反应以及伸长反应用的加热时间成为1秒以上10秒以下的方式使所述反应液移动，
所述核酸扩增反应试剂包含正向引物、反向引物、聚合酶以及荧光标志探针，
包含于所述反应液的所述正向引物的浓度为0.4μM以上3.2μM以下，
包含于所述反应液的所述反向引物的浓度为0.4μM以上3.2μM以下，
包含于所述反应液的所述聚合酶的量为0.5U以上4U以下，
包含于所述反应液的所述荧光标志探针的浓度为0.15μM以上1.2μM以下。
7.一种核酸扩增反应用试剂，其是包含于施加用于使核酸扩增的热循环的反应液的核酸扩增反应用试剂，其特征在于，
在所述热循环中，退火反应以及伸长反应用的加热时间为1秒以上10秒以下，
所述核酸扩增反应用试剂包含正向引物、反向引物、聚合酶以及荧光标志探针，
包含于所述反应液的所述正向引物的浓度为0.4μM以上3.2μM以下，
包含于所述反应液的所述反向引物的浓度为0.4μM以上3.2μM以下，
包含于所述反应液的所述聚合酶的量为0.5U以上4U以下，
包含于所述反应液的所述荧光标志探针的浓度为0.15μM以上1.2μM以下。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于精工爱普生株式会社，未经精工爱普生株式会社许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201710191715.3/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
