[发明专利]一种在肝癌细胞中高效高特异表达靶基因的载体系统在审
| 申请号： | 201710194486.0 | 申请日： | 2017-03-29 |
| 公开（公告）号： | CN108660154A | 公开（公告）日： | 2018-10-16 |
| 发明（设计）人： | 刘利平;邹畅;余小舫;李明岳;张育森;其他发明人请求不公开姓名 | 申请（专利权）人： | 深圳市人民医院 |
| 主分类号： | C12N15/85 | 分类号： | C12N15/85 |
| 代理公司： | 广东国晖律师事务所 44266 | 代理人： | 谭宗成 |
| 地址： | 518000 广东省*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 载体系统 肝癌细胞 特异表达 靶基因 突变型 分泌 靶向治疗 表达效率 载体连接 野生型 构建 肝癌 突变 细胞 | ||
1.一种在肝癌细胞中高效高特异表达靶基因的载体系统，其特征是：所述载体系统包括pGL3-Basic Vector载体，突变型AFP启动子，该突变型AFP启动子连接到pGL3-BasicVector载体，构建载体系统GPS/AFP。
2.如权利要求1所述的高效高特异表达靶基因的载体系统，其特征是：所述突变型AFP启动子为-55 G>A & -119 C>A双突变启动子。
3.如权利要求2所述的高效高特异表达靶基因的载体系统，其特征是：所述突变型AFP启动子核苷酸序列-119 ~ -55为ACAAATGTC CCATTTTCAA CCTAAGGAAA TACCATAAAGTAACAGATAT ACCAACAAAA GGTTAA。
4.如权利要求2所述的高效高特异表达靶基因的载体系统，其特征是：所述突变型AFP启动子核苷酸序列-335 ~ -20为GCCTG GCATATGATA GGCATTTAAT AGTTTTAAAG AATTAATGTATTTAGATGAA TTGCATACCA AATCTGCTGT CTTTTCTTTA TGGCTTCATT AACTTAATTT GAGAGAAATTAATTATTCTG CAACTTAGGG ACAAGTCATG TCTTTGAATA TTCTGTAGTT TGAGGAGAAT ATTTGTTATATTTGCAAAAT AAAATAAGTT TGCAAGTTTT TTTTTTCTGC CCCAAAGAGC TCTGTGTCCT TGAACATAAAATACAAATAA CCGCTATGCT GTTAATTATT GACAAATGTC CCATTTTCAA CCTAAGGAAA TACCATAAAGTAACAGATAT ACCAACAAAA GGTTAATAGT TAACAGGCAT TGCCTGAAAA。
5.如权利要求2所述的高效高特异表达靶基因的载体系统，其特征是：所述突变型AFP启动子核苷酸序列为SEQ ID No.3所示。
6.如权利要求2所述的高效高特异表达靶基因的载体系统，其特征是：所述突变型AFP启动子的扩增引物为：AFP启动子上游引物为：5’-CCG ACG CGT GCG GCC GCA AGC TTT AGAAAA TCC TGG TGC C-3’；下游引物为：5’-CCG CTC GAG TTA ATT AAT GTT ATT GGC AGTGGT GGA AG-3’。
7.如权利要求1-6任一项所述的高效高特异表达靶基因的载体系统，其特征是：该载体系统还包括增强子，所述增强子的核苷酸序列为SEQ ID No.4所示。
8.如权利要求7所述的高效高特异表达靶基因的载体系统，其特征是：所述AFP增强子上游引物为：5’-GTC GGT ACC TCT GAG TGG CTT CAC AGA CT-3’；下游引物为： 5’-GAAACG CGT GGA GAC CAG TTA GGA AGT TT-3’。
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