[发明专利]脂肪来源间充质干细胞外泌体在制备治疗肥胖药物中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及生物医药技术领域，具体涉及脂肪来源间充质干细胞外泌体在制备治疗肥胖药物中的应用。

背景技术

肥胖是指由于能量过剩导致脂肪在体内的过度堆积所致的慢性疾病。肥胖可分为单纯性肥胖和继发性肥胖，通常意义上的肥胖指的是单纯性肥胖，主要是由于能量摄入大于消耗，导致多余能量在体内以脂肪形式过度聚集而成。继发性肥胖是伴随某些疾病发生的，如垂体性肥胖。目前采用体重指数(body mass index,BMI)作为判定肥胖的标准，BMI≥25为超重，≥30视为肥胖。近年来，由于饮食结构和生活方式的改变，无论在发达国家还是发展中国家，肥胖的发病率急剧上升。据2014年世界卫生组织最新统计，中国的超重人群已超过34％。随着肥胖发生率的增加，肥胖引发Ⅱ型糖尿病、心血管疾病甚至癌症等慢性疾病的发病率也逐年增加。因此，肥胖是当今世界范围内一个重要的公共健康问题，针对肥胖的干预策略是防治肥胖相关疾病的重要措施。

机体内脂肪组织可分为以贮存能量为主的白色脂肪组织(肥胖主要累及部位)和以产热方式消耗能量为主的棕色脂肪组织；而白色脂肪组织中出现表达棕色脂肪特异性解偶联蛋白(UCP1)的米色脂肪组织，即白色脂肪米色化，可促进机体以产热方式消耗能量，有效抵抗肥胖的发生发展。

脂肪来源间充质干细胞(ADSC)存在于脂肪组织血管基质成分(SVF)中，具有自我更新和多向分化潜能。ADSC在体外可被诱导分化为脂肪细胞、骨细胞、软骨细胞和内皮细胞等不同的组织细胞，是目前组织修复和再生领域的研究重点和热点。脂肪来源间充质干细胞外泌体可以携带具有生物学活性的蛋白质和RNA多种物质等，并将有效成分及信息高效传递至受体细胞，在细胞间的信息交流中起重要作用。

目前对于脂肪来源间充质干细胞的研究主要涉及在肾脏、眼底疾病中的用途(CN102048756A)、在治疗勃起功能障碍的用途(CN105902568A)、在制备肝纤维化治疗制剂的用途(CN103436555A)、在制备治疗骨性关节炎制剂的用途(CN105748519A)、在制备肝癌化疗增敏制剂中的用途(CN103451152A)等，但迄今还未有关于脂肪来源间充质干细胞及其外泌体在治疗肥胖方面的报道。

发明内容

针对上述现有技术，本发明的目的提供脂肪来源间充质干细胞外泌体在制备治疗肥胖药物中的应用。

本发明研究发现，脂肪来源间充质干细胞外泌体可以在不影响小鼠摄食量的基础上，通过诱导白色脂肪米色化抑制小鼠的体重增加，达到治疗肥胖的作用，由此提出了下述的发明内容：

本发明的第一方面，提供脂肪来源间充质干细胞外泌体在制备治疗肥胖药物中的应用。

本发明中，所述脂肪来源间充质干细胞外泌体由如下方法制备而成：

(1)将剥离的脂肪组织分散于消化液中，以产生细胞悬浮液；

(2)离心细胞悬浮液，以形成细胞沉淀，分离沉淀，洗涤，得到含有脂肪来源间充质干细胞(ADSC)的血管基质成分(SVF)；

(3)在体外培养体系中对ADSC进行扩增培养，收集扩增培养后的上清液，浓缩，向浓缩后的上清液中加入外泌体提取试剂，即提取得到脂肪来源间充质干细胞外泌体。

优选的，步骤(1)中，所述消化液是由KRB缓冲液和Ⅰ型胶原酶组成；更优选的，KRB缓冲液和Ⅰ型胶原酶的组成比例为1ml：2mg。

优选的，步骤(2)中，离心转速为2000rpm，离心时间为5分钟。

优选的，步骤(3)中，扩增培养的条件为：用不含外泌体的10％胎牛血清的DMEM培养基(含有bFGF)培养ADSC。

优选的，步骤(3)中，所述外泌体提取试剂为Exoquick-TCTM外泌体提取试剂。

本发明中，所述脂肪来源间充质干细胞外泌体具有TSG101、CD9、CD63和HSP90标志。

优选的，本发明中，所述脂肪来源间充质干细胞外泌体来源于小鼠附睾处脂肪组织。

本发明的第二方面，提供包含上述脂肪来源间充质干细胞外泌体的组合物在制备治疗肥胖药物中的应用。

本发明的第三方面，提供脂肪来源间充质干细胞外泌体在制备促进白色脂肪米色化的生物制剂中的应用。

本发明的有益效果：