[发明专利]一种景天属植物的遗传转化方法有效
申请号: | 201710205829.9 | 申请日: | 2017-03-31 |
公开(公告)号: | CN106811481B | 公开(公告)日: | 2019-12-24 |
发明(设计)人: | 徐文忠;刘桓;赵海霞 | 申请(专利权)人: | 中国科学院植物研究所 |
主分类号: | C12N15/82 | 分类号: | C12N15/82 |
代理公司: | 11245 北京纪凯知识产权代理有限公司 | 代理人: | 关畅;何叶喧 |
地址: | 100093 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 景天 植物 遗传 转化 方法 | ||
1.一种景天属植物的遗传转化方法,依次包括如下步骤:
(1)取景天属植物的茎段,诱导丛生芽形成,选择生长状况良好、丛生芽密集成团的茎段组织块,切除丛生芽的叶片,并进一步将丛生芽切成块,即为分生组织块;
(2)取步骤(1)得到的分生组织块,与重组农杆菌进行共培养;所述重组农杆菌是将具有目的DNA分子的质粒导入出发农杆菌得到的;
(3)取步骤(2)得到的分生组织块,诱导生芽;
(4)取生芽的分生组织块,诱导生根;
步骤(1)中,所述诱导丛生芽形成是在芽诱导培养基上进行的;所述芽诱导培养基为如下(a1)或(a2):(a1)含有0.1mg/L 6-BA和1.0mg/L NAA的培养基;(a2)含有0.1mg/L 6-BA和1.0mg/L NAA的MS固体培养基;
步骤(2)中,所述质粒上具有潮霉素抗性基因;
步骤(3)中,所述诱导生芽是在筛选培养基上进行的;所述筛选培养基为如下(b1)至(b4)中的任意一种:(b1)含有20mg/L潮霉素、0.1mg/L 6-BA和1.0mg/L NAA的培养基;(b2)含有20mg/L潮霉素、0.1mg/L 6-BA和1.0mg/L NAA的MS固体培养基;(b3)含有20mg/L潮霉素、600mg/L头孢霉素、0.1mg/L 6-BA和1.0mg/L NAA的培养基;(b4)含有20mg/L潮霉素、600mg/L头孢霉素、0.1mg/L 6-BA和1.0mg/L NAA的MS固体培养基。
2.如权利要求1所述的方法,其特征在于:所述诱导生根是在根诱导培养基上进行的;所述根诱导培养基为如下(c1)、(c2)或(c3):
(c1)含有潮霉素和头孢霉素的培养基;
(c2)含有30mg/L潮霉素和600mg/L头孢霉素的培养基;
(c3)含有30mg/L潮霉素和600mg/L头孢霉素的MS固体培养基。
3.如权利要求1或2所述的方法,其特征在于:所述景天属植物为东南景天或伴矿景天。
4.一种用于景天属植物遗传转化的试剂盒,包括权利要求1中所述的芽诱导培养基和筛选培养基。
5.如权利要求4所述的试剂盒,其特征在于:所述试剂盒还包括权利要求2中所述的根诱导培养基。
6.如权利要求4或5所述的试剂盒,其特征在于:所述景天属植物为东南景天或伴矿景天。
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