[发明专利]一种景天属植物的遗传转化方法

说明书

本发明公开了一种景天属植物的遗传转化方法。本发明首先保护一种景天属植物的遗传转化方法，依次包括如下步骤：(1)取景天属植物的茎段，诱导丛生芽形成，得到分生组织块；(2)取步骤(1)得到的分生组织块，与重组农杆菌进行共培养；所述重组农杆菌是将具有目的DNA分子的质粒导入出发农杆菌得到的；(3)取步骤(2)得到的分生组织块，诱导生芽；(4))取生芽的分生组织块，诱导生根。本发明提供的方法，具有遗传转化率高的优点，对于景天属植物的遗传转化以及基因工程研究，具有重大的应用推广价值。

技术领域

本发明涉及一种景天属植物的遗传转化方法。

背景技术

镉(Cd)对所有的有机体都具有严重的毒害作用。目前我国土壤镉污染形式严峻，且有逐年加重的趋势。土壤中的镉具有很强的迁移能力，很容易被植物吸收，并通过食物链进入人体，严重危害人们的身体健康。植物修复(Phytoremediation)是治理镉等土壤重金属污染的一种理想途径。近年来研究较多的镉超富集植物有鼠耳芥、遏蓝菜、东南景天和伴矿景天。镉超富集植物同时也是锌的超富集植物。相对其它镉超富集植物来说，伴矿景天具有镉富集能力强，生物量大等特点(Cao D,Zhang HZ,Wang YD,Zheng LN(2014)Accumulation and distribution characteristics of zinc and cadmium in thehyperaccumulator plant sedum plumbizincicola.B.Environ.Contam.Tox.93,171-176.)。近年来，关于伴矿景天在镉污染土壤植物修复中的研究较多，种植伴矿景天7年之后，土壤中Cd含量降低了87.8％(Deng L,Li Z,Wang J,Liu HY,Li N,Wu LH,Hu PJ,LuoYM,Christie P(2016)Long-term field phytoextraction of zinc/cadmiumcontaminated soil by Sedum plumbizincicola under different agronomic strategies.Int.J.Phytoremediat.18,134-140.)。

目前利用镉超富集植物进行镉污染土壤的植物修复需要长期大量的投资，很难实现大规模商业化应用。关于伴矿景天的研究只停留在小规模的试验阶段，还很难以实际应用。因此，培育具有经济效益的超富集工程植物对镉污染土壤的持续性植物修复具有重要意义。深入研究伴矿景天等超富集植物镉富集和解毒的分子机制，挖掘镉富集相关基因，进而可以为获取镉超富集的工程修复植物提供理论基础和基因元件。若要进行伴矿景天基因功能的研究，前提是能够对其进行基因操作。建立超富集植物的遗传转化体系是揭示这类特殊生境植物对重金属吸收、转运分子机理的关键手段。而且，伴矿景天只对镉锌具有高抗性和超富集能力，但对其它重金属如砷铜汞等却不具有超富集和高抗性。如果能够实现伴矿景天遗传转化，将会极大地促进植物对镉超富集分子机制的研究和相关功能基因的挖掘，并且可以获取对多种重金属复合污染具有抗性和修复能力的伴矿景天工程植物。

发明内容

本发明的目的是提供一种景天属植物的遗传转化方法。

本发明首先保护一种景天属植物的遗传转化方法，依次包括如下步骤：

(1)取景天属植物的茎段，诱导丛生芽形成，得到分生组织块；

(2)取步骤(1)得到的分生组织块，与重组农杆菌进行共培养；所述重组农杆菌是将具有目的DNA分子的质粒导入出发农杆菌得到的；

(3)取步骤(2)得到的分生组织块，诱导生芽；

(4)取生芽的分生组织块，诱导生根。

步骤(1)中，所述诱导丛生芽形成是在芽诱导培养基上进行的；所述芽诱导培养基为如下(a1)、(a2)或(a3)：

(a1)含有6-BA和NAA的培养基；