[发明专利]一种基于生物产香制备无花果香料的方法及其应用

权利要求书

1.一种基于生物产香制备无花果香料的方法，其特征在于：包括以下步骤：

(1)无花果粗提液的制备：将无花果与水按重量比1:20～50混合均匀，90～100℃回流提取1～3次，每次3～5小时，抽滤，合并滤液，得到无花果提取液；

(2)菌种活化：将植生拉乌尔菌(Raoultella planticola VP4-4)接种到固体斜面培养基上，在28～40℃，静置培养24～96h后得到活化菌种，置于4℃冰箱中；

所述的植生拉乌尔菌(Raoultella planticola VP4-4)，保藏号为CCTCC M 2012005，于2012年1月11日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏地址：中国武汉武汉大学；

(3)制备种子培养液：将步骤2)所得的斜面培养物，接种到种子培养基，在28～40℃、100～150r/min条件下振荡培养24～96h，连续转接1～3次，制得种子培养液；

(4)无花果提取液的微生物发酵：将上述步骤(3)的种子培养液，按体积比15～30％接种到上述步骤1)的无花果提取液中，接种后的滤液的装罐量为40～70％，pH5～7，28～40℃，搅拌速度100～120r/min，避光条件下发酵1～6天，得到无花果发酵液；

(5)醇沉纯化：将步骤4)的无花果发酵液浓缩至相对密度1.1～1.3，与95％乙醇按质量比1:3～5混合，静置过夜，4000～10000r/min离心5～20min，取上清液，55～65℃减压浓缩至相对密度为1.0～1.2的无花果浸膏，即为基于生物产香技术制备的无花果香料。

2.如权利要求1所述的基于生物产香制备无花果香料的方法，其特征在于：所述的斜面培养基组成为：黄豆汁125mL，木糖20g/L，琼脂15g/L。

3.如权利要求1所述的基于生物产香制备无花果香料的方法，其特征在于：所述的种子培养基组成为：木糖45g/L，酵母粉8g/L，氯化钠4g/L。

4.一种如权利要求1-3中任一项所述方法制备的无花果香料。

5.一种如权利要求1-3中任一项所述方法制备的无花果香料在卷烟烟丝中的应用，所述无花果香料作为天然烟用添加剂加入卷烟烟丝中，添加量为烟丝质量的百万分之1～3。