[发明专利]UPLC‑QTOF‑MS法检测抗风湿类保健食品中非法添加物质的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种检测抗风湿类保健食品中非法添加物质的方法，尤其是PLC-QTOF-MS法检测抗风湿类保健食品中非法添加物质的方法，属于化学检测技术领域。

背景技术

近年来，由于莲子价格的不断攀升，不少厂家为了节约成本会用芸豆馅料冒充莲蓉馅料。芸豆内除含有维生素、无机盐等营养成分外，还含有一种对人体有害的成分——血球凝集素，该成分经高温烹调后可被破坏。但是如果在芸豆加工过程中，烹调时间短或翻炒不均匀，致使芸豆不熟，可引起食物中毒。芸豆在消化吸收过程中会产生过多的气体，造成胀肚。故消化功能不良、有慢性消化道疾病的人应尽量少食。还有一些对豆类蛋白敏感人群，如误食豆制品，可能会引起过敏性皮炎或严重的会产生休克。这些不适宜食用芸豆类食品的人群若误食没有标示有芸豆成分的莲蓉月饼，可能会造成不可预计的严重后果。

芸豆的检测依据国家标准GB/T 23814-2009莲蓉制品中芸豆成分定性PCR检测方法，该方法为普通PCR法，主要过程为通过特异性基因序列扩增后用凝胶成像的方式鉴别，此法步骤繁琐，干扰因素较多，不利于批量检测。

发明内容

针对上述技术问题，本发明的目的是提供一种检测方法简单，检测结果可靠的抗风湿类保健食品中非法添加物质的检测方法。

为解决上述技术问题，本发明的技术方案是这样的：

一种UPLC-QTOF-MS法检测抗风湿类保健食品中非法添加物质的方法，依次包括下述步骤：

1)制备对照品溶液

取对照品氢化可的松、地塞米松、醋酸泼尼松、阿司匹林、氨基比林、布洛芬、双氯芬酸钠、吲哚美辛、对乙酰氨基酚、甲氧苄啶、吡罗昔康、萘普生、保泰松，分别加甲醇溶解并稀释制成每1mL中含5μg对照品的溶液，即得；

2)制备供试品溶液

A)固体制剂：取1g固体制剂加甲醇25ml超声10分钟，定容到50ml4000r/min离心5min，过滤，待用；

B)液体制剂：取10ml定容至50ml摇匀，4000r/min离心5min，过滤，待用；

3)分别取对照品溶液和供试品溶液各1μL注入UHPLC-QTOF-MS，进行液质联用分析，记录液相色谱图及一级质谱与二级质谱；

4)结果判断

供试品色谱中，不得检出与对照品保留时间一致的色谱峰；若检出保留时间一致的色谱峰，色谱峰的一级质谱及二级质谱均不得与对照品一致色谱峰。

进一步的，上述的一种UPLC-QTOF-MS法检测抗风湿类保健食品中非法添加物质的方法，所述的液质联用分析方法为：

1)正离子模式

乙腈为流动相A，0.1％甲酸-5mmol/L甲酸铵水溶液为流动相B，按照的A∶B的不同比例进行梯度洗脱,所述流动相梯度如下：0-0.5min，70％A、30％B；0.5-7min，70％-5％A、30％-95％B；7-8min，5％A、95％B，后运行时间为2min；

电喷雾离子，毛细管电压4.0KV，喷嘴电压0V，脱溶剂气温度200℃，脱溶剂气流速16L/min，鞘气温度325℃，鞘气流速12L/min，扫描方式采用一级质谱全扫描，采集频率3spectra/s、二级质谱全扫描2spectra/s，碰撞能量：0V、10V、20V；质量采集范围50-1000m/z；

2)负离子模式：乙腈为流动相A：5mmol/L乙酸铵水溶液为流动相B，所述流动相梯度如下：0-0.5min，95％A、5％B；0.5-10min，95％-5％A、5％-95％B；10-11min，5％A、95％B，后运行时间为2min；

电喷雾离子源，毛细管电压3.5KV，喷嘴电压0.5KV，脱溶剂气温度130℃，脱溶剂气流速16L/min，鞘气温度200℃，鞘气流速12L/min，扫描方式采用一级质谱全扫描3spectra/s、二级质谱全扫描2spectra/s，碰撞能量：0V，10V，20V；质量采集范围50-1050m/z。

进一步的，上述的一种UPLC-QTOF-MS法检测抗风湿类保健食品中非法添加物质的方法，所述的UPLC色谱柱采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，1.7μm粒径，5.0×3.0mm，流速：0.3ml/min；柱温：45℃。

本发明与现有技术相比，本发明提供的方法检测速度快，检测结果准确可靠，可重复性强。

附图说明

图1是氢化可的松在碰撞能量10V时二级图谱；

图2是氢化可的松在碰撞能量20V时二级图谱；