[发明专利]一种用于输注糖尿病的活性间充质干细胞注射液在审
申请号: | 201710208917.4 | 申请日: | 2017-03-31 |
公开(公告)号: | CN107090431A | 公开(公告)日: | 2017-08-25 |
发明(设计)人: | 郝好杰;李梓源;易军;周严恒;刘刚;陈惠华 | 申请(专利权)人: | 北京恒峰铭成生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N5/0775 | 分类号: | C12N5/0775;A61K35/28;A61K9/08;A61K47/42;A61P3/10 |
代理公司: | 北京市商泰律师事务所11255 | 代理人: | 毛燕生 |
地址: | 102208 北京市昌平区*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 糖尿病 活性 间充质 干细胞 注射液 | ||
1.一种活性间充质干细胞,其为糖尿病样微环境激活的间充质干细胞,所述糖尿病样微环境为终浓度为20~50mmol/L的葡萄糖溶液和终浓度为0.2~0.4mmol/L棕榈酸溶液。
2.根据权利要求1所述的活性间充质干细胞,所述间充质干细胞为脐带间充质干细胞、脂肪间充质干细胞、骨髓间充质干细胞。
3.一种活性间充质干细胞的制备方法,其包括的步骤为:a)将分离提取的间充质干细胞在无血清培养基中培养至融合达40~50%的单层细胞;b)在步骤a)所述的单层细胞中加入终浓度20~50mmol/L的葡萄糖溶液和终浓度为0.2~0.4mmol/L棕榈酸溶液;c)培养所述单层细胞融合达75~80%时,移去培养上清液,用胰蛋白酶-EDTA消化,所述间充质干细胞收缩脱离瓶壁,加入所述移去的培养上清液,中和所述胰蛋白酶-EDTA,再使用移液管轻轻吹打,将细胞悬液移入50mL无菌离心管;d)加入无菌生理盐水,离心并使用所述生理盐水洗涤三次,获得糖尿病样微环境激活的间充质干细胞。
4.根据权利要求3所述的活性间充质干细胞的制备方法,所述步骤b)中葡萄糖的终浓度为30mmol/L,棕榈酸的终浓度为0.2mmol/L。
5.根据权利要求3所述的制备方法,所述步骤c)中所述单层细胞融合达75~80%,所用培养时间为48±2小时。
6.一种用于输注糖尿病的活性间充质干细胞注射液,其包括以下组分:数量为5×105~2×106个/mL的糖尿病样微环境激活的间充质干细胞、质量体积比为1~5%的人血白蛋白、质量体积比为1~5%的复方维生素、质量体积比为1~8%的甘露醇、质量体积比为0.5~2.5%的葡萄糖和余量的生理盐水。
7.根据权利要求6所述的用于输注糖尿病的活性间充质干细胞注射剂,所述糖尿病样微环境激活的间充质干细胞为在无血清培养基中培养至融合达40~50%的单层细胞时加入终浓度为20~50mmol/L的葡萄糖溶液和终浓度为0.2~0.4mmol/L棕榈酸溶液,连续培养48±2小时的间充质干细胞。
8.根据权利要求7所述的用于输注糖尿病的活性间充质干细胞注射剂,所述葡萄糖的终浓度为30mmol/L,棕榈酸的终浓度为0.2mmol/L。
9.根据7或8任一权利要求所述的用于输注糖尿病的活性间充质干细胞注射液,所述间充质干细胞选自脐带、骨髓、脂肪组织,所述干细胞活力保持在95%以上。
10.权利要求6-9任一所述的用于输注糖尿病的活性间充质干细胞注射液在制备治疗糖尿病药物中的应用,其特征在于,所述糖尿病为2型糖尿病。
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