[发明专利]一种用于输注糖尿病的活性间充质干细胞注射液

说明书

技术领域

本发明属于生物医药领域，尤其涉及一种糖尿病样微环境激活的间充质干细胞的制备，一种用于输注糖尿病的活性间充质干细胞注射液及其用于糖尿病药物的应用。

背景技术

糖尿病是一种复杂的代谢疾病，随着现代生活方式的改变，糖尿病的发病率居高不下。2016年世界卫生组织糖尿病数据显示，仅中国就有1.376亿成人患有糖尿病，发病率高达10％，其中，95％是2型糖尿病(T2D)。T2D的主要病因包括靶组织中的胰岛素抵抗，胰岛素分泌相对不足，以及随后胰岛β细胞功能的减退。目前用于T2D的传统疗法包括胰岛素敏化剂改善高血糖和使用外源性胰岛素来补充胰岛素不足，虽然这些药物可以改善高血糖或暂时改善对靶组织中胰岛素的反应，但它们在延缓进行性β细胞功能障碍方面不是非常有效，因此无法稳定血糖，患者需终身使用降糖药或胰岛素。胰岛移植为治愈糖尿病提供了可能性，但由于胰岛来源受限，且配型困难，手术成功率低，治疗后需要长期服用抗免疫排斥药物，限制了此技术的广泛应用。长期的血糖增高，更会引起各个器官的并发症产生，糖尿病的高致残率、高死亡律已引起高度重视。因此，糖尿病治疗亟待寻找一种新的治疗方法。

间充质干细胞(MSC)是最重要的多能成体干细胞之一，具有自我更新和自我分化潜能，以及分泌多种因子参与损伤的组织与器官的修复与再生而被广泛应用于多种疾病的治疗。MSCs在体内或体外特定的诱导条件下，可分化为胰岛、神经、血管内皮、骨、软骨、肌肉、肝脏、心肌等多种组织细胞，除此之外，MSCs还具有低免疫原性和独特的免疫调节作用，能逃避免疫识别、抑制免疫应答。MSC可以从骨髓、脂肪、胎盘脐带等多种组织中获得，具有易于分离培养，体外连续传代培养及冷冻保存后仍保持其分化潜能及增值能力的特点。

干细胞的重要特征之一是能够进行不对称分裂，干细胞所处的微环境对分裂过程起着重要的调控作用。环境因素维持着干细胞的特征、为干细胞的自我更新提供了合适的外部条件，并且影响干细胞的自我更新和自我分化。环境因素负反馈触发MSCs的反应机制，产生修复与再生。已经有研究表明，MSC可能发挥治疗糖尿病的作用，增加胰岛素分泌和校正高血糖(R.H.Lee,M.J.Seo,R.L.Reger,J.L.Spees,A.A.Pulin,S.D.Olson,D.J.Prockop,Multipotent stromal cells from human marrow home to and promote repair of pancreatic islets and renal glomeruli in diabetic NOD/scid mice,Proc.Natl.Acad.Sci.USA 103(2006)17438–17443.F.Ezquer,M.Ezquer,D.Contador,M.Ricca,V.Simon,P.Conget,The antidiabetic effect of mesenchymal stem cells is unrelated to their transdifferentiation potential but to their capability to restore Th1/Th2 balance and to modify the pancreatic microenvironment,Stem Cells 30(2012)1664–1674.)。

然而，目前的MSCs，无论来源于脐带，还是自体骨髓或脂肪组织，均不是特异修复T2D的，这在很大程度上限制了MSCs的治疗效果。前期的文献报道，无论临床试验还是动物实验，用MSCs的输注治疗T2D均无法使高血糖恢复至正常水平，且经过一定的时间后血糖又有不同程度的升高。

基于上述问题，本发明进行研究，对MSCs进行处理，得到一种糖尿病样微环境负反馈调节激活的间充质干细胞注射液，用于输注治疗T2D。

发明内容

针对通用型的间充质干细胞(MSCs)输注液治疗2型糖尿病(T2D)存在效率不高的问题，本发明提供了一种糖尿病样微环境激活的间充质干细胞制备方法，一种用于输注糖尿病的活性间充质干细胞注射液，其制备方法和在用于糖尿病药物中应用。

为实现上述发明目的，本发明采用下述技术方案予以实现：

一种活性间充质干细胞，其为糖尿病样微环境激活的间充质干细胞，所述糖尿病样微环境为终浓度为20～50mmol/L的葡萄糖溶液和终浓度为0.2～0.4mmol/L棕榈酸溶液。

所述间充质干细胞为脐带间充质干细胞、脂肪间充质干细胞、骨髓间充质干细胞。