[发明专利]一种能在常温下对氨基酸有效拆分的手性冠醚柱

权利要求书

1.一种能在常温下对氨基酸有效拆分的手性冠醚柱，其特征在于：合成R‐(3,3'‐氯基‐1,1'‐二萘基)‐20‐冠‐6冠醚，并通过物理涂敷的方法将冠醚涂敷在C18表面，再经填装后制备成高效液相色谱手性冠醚柱。

2.根据权利要求1所述的能在常温下对氨基酸有效拆分的手性冠醚柱，具体由以下方法制备得到：

(1)R‐(3,3'‐氯基‐1,1'‐二萘基)‐20‐冠‐6的合成：

在N₂保护下，在圆底烧瓶中加入150ml丙酮，再加入8g R‐联萘酚，20g碳酸钾，加热到70℃，缓慢滴加5.1mL碘甲烷，回流12h后TCL检测，减压旋蒸除去溶剂，用蒸馏水和二氯甲烷萃取，用无水NaSO₄固体干燥、过滤后，减压除去溶剂，残留物经硅胶柱纯化过柱，洗脱剂为丙酮:石油醚＝1:40，得到白色晶体B；

在N₂保护下，将4g白色晶体B溶解到150mL乙醚溶液中，再加入32.1mL的正丁基锂和5.6mL的四甲基二乙胺，在25℃下搅拌8h，将反应物冷却到‐78℃，将8g六氯乙烷溶解在20mL正戊烷溶液中，在15min内加入到反应液中，搅拌1h后将反应物缓慢升温到25℃搅拌12h；加入160mL饱和Na₂SO₃溶液搅拌除去多余的液溴；混合物用二氯甲烷和蒸馏水萃取，有机相用无水Na₂SO₄干燥和蒸发，用硅胶柱纯化，洗脱剂为丙酮:石油醚＝1:20，得白色晶体C；

取4g白色晶体C溶解于150ml无水二氯甲烷中，在0℃下缓慢加入4ml的BBr₃，缓慢升至25℃，反应24h后降到0℃，加入蒸馏水除去多余BBr₃，用二氯甲烷和水萃取，无水MgSO₄干燥有机层硅胶柱色谱纯化，洗脱剂为丙酮:石油醚＝1:10，得到白色化合物D；

在氮气保护下，将2g白色化合物D溶解到200ml无水四氢呋喃THF中，加入2.5g五甘醇对甲苯磺酸酯和0.24g KOH，在60℃磁力均匀搅拌下回流72h，TCL检测，用二氯甲烷和蒸馏水多次萃取，用无水MgSO₄干燥有机层并用硅胶柱纯化，洗脱剂为丙酮:石油醚＝1:1，得到淡黄色粘稠液体，即为所需的R‐(3,3'‐氯基‐1,1'‐二萘基)‐20‐冠‐6冠醚。

(2)手性冠醚的涂敷：

取0.3g冠醚溶解于15mL的二氯甲烷中，得冠醚溶液；称取2g 5μm的C18硅胶装在25mL圆底烧瓶中，用物理涂敷方法将所得冠醚溶液涂敷在C18硅胶上，旋转蒸发除去有机溶剂DMC，得到R‐(3,3'‐氯基‐1,1'‐二萘基)‐20‐冠‐6手性冠醚固定相；

(3)手性色谱柱的填装：

取所得R‐(3,3'‐氯基‐1,1'‐二萘基)‐20‐冠‐6手性冠醚固定相1.5g和25mL甲醇水溶液搅拌形成悬浮液，甲醇与水的体积比＝1：10；过筛板250目待用，蒸馏水作流动相顶替液，在40MPa压力下装填，即得到所需的手性冠醚柱。

3.根据权利要求1或2所述的能在常温下对氨基酸有效拆分的手性冠醚柱，其特征在于：用所述的手性冠醚柱对氨基酸进行液相色谱手性拆分的色谱条件：流动相pH＝2的高氯酸，使用前用0.45μm滤膜过滤，并经超声波脱气，流速V＝0.4mL/min,柱温T＝25℃,色谱柱检测波长为210nm。