[发明专利]流感病毒rRT-PCR检测引物和探针及检测H7N9亚型流感病毒的方法有效
申请号: | 201710220887.9 | 申请日: | 2017-04-06 |
公开(公告)号: | CN107043829B | 公开(公告)日: | 2020-09-29 |
发明(设计)人: | 舒跃龙;李晓丹;王大燕 | 申请(专利权)人: | 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/686;C12N15/11;C12R1/93 |
代理公司: | 北京凯特来知识产权代理有限公司 11260 | 代理人: | 郑立明;赵镇勇 |
地址: | 100052 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 流感病毒 rrt pcr 检测 引物 探针 h7n9 方法 | ||
1.一种流感病毒rRT-PCR检测引物和探针,其特征在于,包括以下两组引物和探针:
针对新型高致病性H7N9亚型流感病毒HA基因相对保守区域设计的两组引物探针,两组引物的正向引物和探针相同,反向引物不同,即共计有正向引物一条,反向引物两条,探针一条;
其中针对新型高致病性H7N9亚型流感病毒HA基因正向引物与新型高致病性H7N9亚型流感病毒HA基因的正链碱基序列一致,反向引物与负链的碱基序列一直,而探针与目的基因负链的碱基序列一致;
所述两组新型高致病性H7N9亚型流感病毒特异性引物和探针包括以下一条正向引物序列,两条反向引物序列和一条探针序列:
第一组引物序列:5’-CAGTTGGAAAATGTCCGAGATAT-3’;
5’-GAAACCCGCTATAGCACCAAATA-3’;
探针序列:5’FAM-AGGCCTCTCGCAGTCCGTTTTC-BHQ1 3’;
第二组引物序列:5’-CAGTTGGAAAATGTCCGAGATAT-3’;
5’-GCCTTCCCATCCATTTTCAATGA-3’;
探针序列:5’FAM-AGGCCTCTCGCAGTCCGTTTTC-BHQ1 3’。
2.一种权利要求1所述的流感病毒rRT-PCR检测引物和探针在制备检测H7N9亚型流感病毒试剂中的应用,其特征在于,包括步骤:
首先,利用核酸提取试剂从待测样本中提取流感病毒RNA;
然后,利用一步法rRT-PCR试剂盒加入所述引物和探针进行核酸扩增;
之后,根据Ct值判断rRT-PCR检测结果,判断待检样本新型高致病性H7N9亚型流感病毒是否阳性。
3.根据权利要求2所述的流感病毒rRT-PCR检测引物和探针在制备检测H7N9亚型流感病毒试剂中的应用,其特征在于,所述流感病毒包括新型高致病性H7N9亚型流感病毒。
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