[发明专利]一种用于检测大鼠鼠源性成分的方法有效
申请号: | 201710221364.6 | 申请日: | 2017-04-06 |
公开(公告)号: | CN107012219B | 公开(公告)日: | 2020-09-01 |
发明(设计)人: | 王学政;鲁艳芹;刘志胜;季福玲 | 申请(专利权)人: | 青岛元信检测技术有限公司 |
主分类号: | C12Q1/6888 | 分类号: | C12Q1/6888;C12Q1/686;C12N15/11 |
代理公司: | 济南金迪知识产权代理有限公司 37219 | 代理人: | 朱家富 |
地址: | 266109 山东省青*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 检测 大鼠 鼠源性 成分 方法 | ||
1.一种用于检测大鼠鼠源性成分的方法,其特征在于,步骤如下:
(1)取待检测样品,提取DNA;
(2)以步骤(1)提取的DNA为模板,进行实时荧光定量PCR扩增;上游特异性引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,下游特异性引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示,特异性探针的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示;
(3)当测得的Cp平均值为小于35时,曲线有明显指数增长期,呈现阳性,则待检测样品中含有大鼠鼠源性成分。
2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤(1)中,DNA的浓度为360ng/μL,纯度为1.90。
3.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤(1)中,提取DNA为利用深加工食品DNA提取试剂盒进行提取。
4.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤(2)中,PCR反应体系50μL,成分如下:
DNA模板1μL,浓度为10μM的上游特异性引物1μL,浓度为10μM的下游特异性引物1μL,浓度为10μM的特异性探针1μL,2×RealStar Power Probe Mixture UNG 25ul,剩余部分用Rnase-free H2O补足。
5.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤(2)中,所述PCR反应程序如下:
50℃5min;95℃10min;95℃15s,62℃15s,72℃35s,40个循环,在72℃采集荧光信号。
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