[发明专利]一种牛奶中双酚A残留的表面增强拉曼检测方法

权利要求书

1.一种牛奶中双酚A残留的表面增强拉曼检测方法，其特征在于该方法按以下步骤进行：

一、制备金纳米粒子溶胶，然后利用卤化物水溶液修饰Au NPs，得到卤化物修饰的具有SERS活性的Au NPs改性基底；其中所述的卤化物为氟化钾、氯化钾、溴化钾或者碘化钾；

二、向待测牛奶样品中添加体积比为3:1的甲醇/水混合溶剂，超声处理1～3min，再离心分离处理8～15min，移出上清液在室温下自然蒸发至干得到残余物；再向残余物中加入体积比为3:1的甲醇/水混合溶剂并超声处理1～3min，再离心分离处理5～8min，移出上清液，依次用0.45μm和0.22μm的水系膜对上清液进行过滤，得到待测牛奶样品上清液；

三、将卤化物修饰的具有SERS活性的Au NPs改性基底与待测牛奶样品上清液混合，然后再向混合物中添加硫酸盐水溶液作为聚集剂，之后再将其加载到玻璃点样毛细管中，得到待测牛奶样品检测管；其中所述的硫酸盐为硫酸钠、硫酸锌或硫酸铝；四、用拉曼光谱仪测试步骤三得到的待测牛奶样品检测管的表面增强拉曼光谱，将该光谱与双酚A标准品的拉曼图谱比对，如果待测牛奶样品的表面增强拉曼光谱中出现双酚A标准品的特征信号峰，则说明待测牛奶样品存在双酚A。

2.根据权利要求1所述的一种牛奶中双酚A残留的表面增强拉曼检测方法，其特征在于步骤一中，制备金纳米粒子溶胶，然后利用卤化物水溶液修饰Au NPs，制备卤化物修饰的具有SERS活性的Au NPs改性基底的具体步骤如下：

a、将1mL1％的HAuCl₄加入到装有99mL去离子水的三口烧瓶中，在磁力搅拌下加热使其溶解；当溶液加热至94℃的沸腾状态时加入4mL质量百分浓度为1％的柠檬酸钠水溶液，三口烧瓶中溶液由无色透明逐渐转变成淡紫色、紫色，最终生成酒红色的透明溶胶；透明溶胶在96℃的微沸状态下保持15min，然后停止加热，自然冷却至室温，得到金溶胶；

b、将Au NPs溶胶离心，得到Au NPs浓缩物；将卤化物水溶液与Au NPs浓缩物混合均匀，静止，得到卤化物修饰的Au NPs改性基底。

3.根据权利要求2所述的一种牛奶中双酚A残留的表面增强拉曼检测方法，其特征在于步骤b中，离心时间为5～10min，离心速度为5000～10000转/秒；Au NPs浓缩物与卤化物水溶液混合的体积比为1：1。

4.根据权利要求2所述的一种牛奶中双酚A残留的表面增强拉曼检测方法，其特征在于步骤b中卤化物水溶液的浓度为1×10^-2～1×10^-4mol/L。

5.根据权利要求2所述的一种牛奶中双酚A残留的表面增强拉曼检测方法，其特征在于步骤b中，卤化物水溶液与Au NPs浓缩物混合后的静止时间为5～10min。

6.根据权利要求1或2所述的一种牛奶中双酚A残留的表面增强拉曼检测方法，其特征在于步骤三中，卤化物修饰的具有SERS活性的Au NPs改性基底与待测牛奶样品上清液的体积比为1：1。

7.根据权利要求1或2所述的一种牛奶中双酚A残留的表面增强拉曼检测方法，其特征在于步骤三中硫酸盐水溶液的浓度为1×10^-2～1×10^-4mol/L。

8.根据权利要求1或2所述的一种牛奶中双酚A残留的表面增强拉曼检测方法，其特征在于步骤三中，硫酸盐水溶液的添加体积为10μL。