[发明专利]一种奈米非肽液相制备方法

说明书

本发明提供了一种奈米非肽液相制备方法，包括以下步骤：1)以Dpm‑NH2和Fmoc‑Trp(Boc)‑OH制备中间体1H‑Trp(Boc)‑NH‑Dpm；2)制备中间体2H‑Gly‑Trp(Boc)‑NH‑Dpm；3)制备中间体3H‑Arg(Pbf)‑Gly‑Trp(Boc)‑NH‑Dpm；4)制备中间体4H‑4‑hydropro(OtBu)‑Arg(Pbf)‑Gly‑Trp(Boc)‑NH‑Dpm；5)制备中间体5H‑4‑Fphe‑4‑hydropro(OtBu)‑Arg(Pbf)‑Gly‑Trp(Boc)‑NH‑Dpm；6)制备奈米非肽粗品；7)反相色谱制备奈米非肽。本发明的方法纯化收率高，适合规模化生产。

技术领域

本发明涉及医药领域，具体涉及奈米非肽液相制备方法。

背景技术

单相抑郁是一种常见的由于中枢神经系统化学物质变化产生的精神紊乱，属于内源性抑郁症。使用抗抑郁药物治疗单相抑郁在医学界已经得到广泛认可。奈米非肽是一种脑内源性多肽MIF-1的类似物，可通过作用5-HT再摄取而发挥抗单相抑郁作用，极大改变了5-HT的再摄取，作用快，可通过血脑屏障，且在脑内清除较慢。目前美国InnapMarma公司正在进行III期临床试验，其抗抑郁活性和安全性已得到临床证实。

奈米非肽，英文名：nemifitide；分子式：C₃₃H₄₃FN₁₀O₆；CAS：173240-15-8；是一种人工合成的五肽化合物，结构为4-氟-L-苯丙氨酰-(反式)4-羟基-L-脯氨酰-L-精氨酰-甘氨酰-L-色氨酰胺，见下式：

目前，奈米非肽的合成方法在国内外少有报道，原研专利报道了奈米非肽固相合成方法(US5589460，WO1995030430A1)，此方法是以Fmoc保护的氨基酸为反应原料，采用氨基树脂依次偶联，裂解后得到的粗肽经过HPLC纯化得到产品。经过本发明人研究发现，原研专利的方法可以得到合格产品，总收率只有40％。分析原因主要有以下几点：裂解后的粗肽产品纯度低，片段缺失肽杂质多，因此纯化收率不高，不适合规模化生产。

发明内容

本发明的目的是提供一种奈米非肽的液相制备方法，该方法合成条件温和、工艺简单且工艺稳定，适合工业化连续生产。

合成路线如下所示：

本发明奈米非肽的制备方法，包括以下步骤：

1)以Dpm-NH₂和Fmoc-Trp(Boc)-OH制备中间体1H-Trp(Boc)-NH-Dpm；

2)制备中间体2H-Gly-Trp(Boc)-NH-Dpm；

3)制备中间体3H-Arg(Pbf)-Gly-Trp(Boc)-NH-Dpm；

4)制备中间体4H-4-hydropro(OtBu)-Arg(Pbf)-Gly-Trp(Boc)-NH-Dpm；

5)制备中间体5H-4-Fphe-4-hydropro(OtBu)-Arg(Pbf)-Gly-Trp(Boc)-NH-Dpm；

6)制备奈米非肽粗品；

7)反相色谱制备奈米非肽。

具体地，本发明一个方面提供了一种奈米非肽液相制备方法,其包括如下步骤,

1)以Dpm-NH₂和Fmoc-Trp(Boc)-OH在缩合剂的作用下合成Fmoc-Trp(Boc)-NH-Dpm，脱除Fmoc保护基，获得中间体1H-Trp(Boc)-NH-Dpm；