[发明专利]一种野葛柱头可授性的测定方法在审
| 申请号： | 201710225781.8 | 申请日： | 2017-04-07 |
| 公开（公告）号： | CN107101963A | 公开（公告）日： | 2017-08-29 |
| 发明（设计）人： | 郭坤元;林先明;郭汉玖;何美军;王华;张宇;穆森 | 申请（专利权）人： | 湖北省农业科学院中药材研究所 |
| 主分类号： | G01N21/33 | 分类号： | G01N21/33 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 445000 湖北省恩施*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 野葛 柱头 可授性 测定 方法 | ||
1.一种野葛柱头可授性的测定方法，其特征在于包含有以下步骤：
a.制备反应液：将MTT和70.0％-90.0％的混合溶液按1:19比例制成反应液或将1％联苯胺和3％过氧化氢及水按体积4:11:22比例制成联苯胺-过氧化氢反应液；将150-200微升的反应液转移到0.5毫升离心管中，备用；所述的70.0％-90.0％混合溶液为：浓度为70.0％-90.0％的二甲基亚砜(DMSO)或异丙醇或乙醇；所述的MTT为：3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐；
b.野葛柱头的准备：距柱头1.0-2.0厘米切断野葛柱头，备用；
c.吸光值A的测定：将切断的野葛柱头按柱头朝下，倒置放入离心管中，柱头在反应液中浸渍6分钟后，反应液显示出颜色，采用紫外分光光度计对反应液在650纳米波长下进行检测得吸光值A；
d.柱头可授性A值的计算：按照公式：A＝(B1+B2+B3+B4+B5+B6)/6＝B/6计算，同时比较实验结果重复性的好坏；式中B1-B6表示实验重复六次每一次得到的吸光值，B表示六次吸光值B1+B2+B3+B4+B5+B6得到的总和。
2.按照权利要求1所述的一种野葛柱头可授性的测定方法，其特征在于包含有以下步骤：a.制备反应液：将MTT和70.0％-90.0％的混合溶液按1:19比例制成反应液或将1％联苯胺和3％过氧化氢及水按体积4:11:22比例制成联苯胺-过氧化氢反应液；根据柱头的大小将150-200微升的反应液转移到0.5毫升离心管中，备用；所述的70.0％-90.0％混合溶液为：浓度为70.0％-90.0％的二甲基亚砜(DMSO)或异丙醇或乙醇；所述的MTT为：3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐；
b.野葛柱头的准备：采集不同时期的野葛花，在将要准备测定柱头可授性时，距柱头1.0-2.0厘米处切断野葛柱头备用，以保证实验材料的新鲜度和活力度；
c.吸光值A的测定：将切断的野葛柱头按柱头朝下，倒置放入离心管中，柱头在反应液中浸渍6分钟后，反应液显示出颜色，采用紫外分光光度计对反应液在650纳米波长下进行检测得吸光值A；
d.柱头可授性A值的计算：
按照公式：A＝(B1+B2+B3+B4+B5+B6)/6＝B/6计算，同时比较实验结果重复性的好坏；式中B1-B6表示实验重复六次每一次得到的吸光值，B表示六次吸光值B1+B2+B3+B4+B5+B6得到的总和。
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