[发明专利]一种分泌抗总黄曲霉毒素单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其应用有效
申请号: | 201710227939.5 | 申请日: | 2017-04-10 |
公开(公告)号: | CN107083368B | 公开(公告)日: | 2020-01-31 |
发明(设计)人: | 何方洋;崔海峰;洪小栩;万宇平;吴小胜;袁媛;鲁亚辉;杨昌松;杨春燕 | 申请(专利权)人: | 北京勤邦生物技术有限公司 |
主分类号: | C12N5/20 | 分类号: | C12N5/20;C07K16/14;G01N33/577 |
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地址: | 102206 北京市昌平*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 黄曲霉毒素 保藏 交叉反应 单克隆抗体 分泌 中国微生物菌种 杂交瘤细胞株 中药 微生物中心 免疫检测 真菌毒素 灵敏度 污染菌 细胞株 重金属 炮制 农药 应用 管理 | ||
1.一种分泌抗总黄曲霉毒素单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为抗总黄曲霉毒素单克隆抗体杂交瘤细胞株F-3-1,已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为CGMCC No.13806,保藏日期为2017年03月08日,其特征在于:所述杂交瘤细胞株是通过AFs半抗原与牛血清白蛋白偶联得到免疫抗原后免疫小鼠制备并筛选得到的;所述AFs半抗原的合成方法为:在25mL圆底烧瓶中加入100mg黄曲霉毒素B1和5mL N,N-二甲基甲酰胺,机械搅拌溶解,0℃条件下缓慢滴加147.3mg三氯氧磷,升温至40℃,并在磁力搅拌下反应2h,再升温至80℃继续搅拌反应3h,反应结束后,自然冷却,缓慢倒入冰水中,加入NaOH质量分数为10%的水溶液调节溶液pH=7~8,用乙酸乙酯30mL,萃取三次,合并有机相,无水硫酸钠干燥蒸干,无水乙醇重结晶,得黄色固体醛基黄曲霉毒素B1 103mg,即为AFs半抗原。
2.一种抗总黄曲霉毒素单克隆抗体,其特征在于:它是由权利要求1所述保藏编号为CGMCC No.13806的抗总黄曲霉毒素单克隆抗体杂交瘤细胞株F-3-1分泌产生的。
3.权利要求2所述抗总黄曲霉毒素单克隆抗体的应用,其特征在于:用于中药中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2总量的分析检测。
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