[发明专利]嗜水气单胞菌表面特异性抗原AhsA及其抗体和应用在审
| 申请号： | 201710233498.X | 申请日： | 2017-04-11 |
| 公开（公告）号： | CN107164348A | 公开（公告）日： | 2017-09-15 |
| 发明（设计）人： | 权春善;许永斌;刘爽;王路路;陈金利 | 申请（专利权）人： | 大连民族大学 |
| 主分类号： | C12N9/52 | 分类号： | C12N9/52;C12N15/57;C07K16/06;C07K16/12;G01N33/569 |
| 代理公司： | 大连智高专利事务所(特殊普通合伙)21235 | 代理人： | 胡景波 |
| 地址： | 116600 辽宁省*** | 国省代码： | 辽宁;21 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 水气 单胞菌 表面 特异性 抗原 ahsa 及其 抗体 应用 | ||
1.嗜水气单胞菌表面特异性抗原AhsA，其特征在于，由基因片段在大肠杆菌细胞中表达，并经过纯化浓缩得到；所述基因片段序列如下：
TCAGCTGCCGCTCTGGGGGTCGTCGATCACCAGCTTGCCATCCTTGACCGGGATGGTGGCGCCGGGGGCC
TTGTTCATGCGGATCACCCCTTCCTGACCGGCGAGGCGGTAGGTGACGTCATAGCCAAGGGTGCGGGTGC
TGCTCTCTTGCACCGTCTTGCAGCGCTGTTCGGTGGTGGTGTAGGTATCACCGGCCTGCATGTTGCCCTG
CACCTGGTTGCCGGCATAGCCACCCGCCACGGCGCCTGCGGCGGTCGCCACCTTCTTGCCGTTGCCGCCA
CCAAACTGGTTGCCGAGCACCCCGCCCAGCGCCGCACCGACCACGGTACCCAGGATCTTGTGCTCGTCCT
GCACCGGTTTGCGGTGGGTCACGCTGACGTTGCGACACTCCTGACGGGGGGTCTTGATGGTCTCGGTCAC
CGCTTTGCTGGCCAGCACTTCGGCGAACTGAGGCTGTGATGAAAACAGGGATCCGCTGGCGGCGGCTGAC
AAGGCCAGCGCAGAGGCCACACCGATCCCGACTCCTGCCAACATGGATTTGTTCAT。
2.如权利要求1所述的嗜水气单胞菌表面特异性抗原AhsA，其特征在于，经纯化浓缩的抗原AhsA浓度为10mg/L。
3.如权利要求1所述的嗜水气单胞菌表面特异性抗原AhsA，其特征在于，制备方法为：将所述的基因片段的编码区克隆进pET-28a载体，转化大肠杆菌BL21感受态细菌；待感受态细菌生长至对数生长期前期，以0.5mM IPTG诱导表达AhsA蛋白，25℃诱导24小时后离心收集菌体；
将收集的菌体以20mM Tris-HCl,150mM NaCl重悬，超声裂解，离心取裂解液上清液，将上清液通过镍柱纯化，以咪唑溶液洗脱，再进行凝胶过滤纯化。
4.一种利用权利要求1所述的嗜水气单胞菌表面特异性抗原AhsA制备的抗体，其特征在于，制备方法如下：
S1.原核表达和纯化表面特异性抗原AhsA；
S2.免疫家兔，获得含嗜水气单胞菌多克隆抗体的血清；
S3.纯化血清，获得纯化的基于嗜水气单胞菌表面特异性抗原AhsA的多克隆抗体。
5.如权利要求4所述的嗜水气单胞菌表面特异性抗原AhsA制备的抗体在特异性的识别嗜水气单胞菌方面的应用。
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