[发明专利]STORM/PALM显微成像方法及装置在审
申请号: | 201710235084.0 | 申请日: | 2017-04-11 |
公开(公告)号: | CN108693151A | 公开(公告)日: | 2018-10-23 |
发明(设计)人: | 毕国强;王浩;祝清源;刘北明;杨倩如;徐程 | 申请(专利权)人: | 中国科学技术大学 |
主分类号: | G01N21/64 | 分类号: | G01N21/64;G01N21/01 |
代理公司: | 中科专利商标代理有限责任公司 11021 | 代理人: | 任岩 |
地址: | 230026 安*** | 国省代码: | 安徽;34 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 活化 成像 折射率匹配液 成像物镜 显微成像 厚样品 激发光 照明光 光化学 飞秒脉冲激光 折射率匹配 成像提供 成像透镜 方式照明 化学环境 时间稳定 有效控制 扫描光 双光子 行扫描 样品池 散射 深部 分辨 匹配 照射 合并 | ||
1.一种STORM/PALM显微成像方法,其特征在于,包括以下步骤:
步骤S1、将样品置于具有与样品匹配的折射率匹配液的样品池中;
步骤S2、产生激发光和活化光;
步骤S3、将所述激发光和活化光合并形成照明光;
步骤S4、用所述照明光照射样品,通过成像物镜完成样品的成像,且所述成像物镜的前端置于所述折射率匹配液中。
2.如权利要求1所述的STORM/PALM显微成像方法,其特征在于,所述折射率匹配溶液包含有5%以上的葡萄糖;所述折射率匹配溶液的折射率为1.35~1.50。
3.如权利要求2所述的STORM/PALM显微成像方法,其特征在于,所述折射率匹配溶液还包含有添加剂,所述添加剂包括三羟甲基氨基甲烷、碳酸二氢钙、磷酸氢钙和氯化钙中的至少一种。
4.如权利要求1所述的STORM/PALM显微成像方法,其特征在于,所述活化光为飞秒脉冲激光以扫描光片照明的方式提供的活化光。
5.如权利要求4所述的STORM/PALM超高分辨显微成像方法,其特征在于,所述飞秒脉冲激光的波长范围为690nm~1080nm。
6.如权利要求1所述的STORM/PALM显微成像方法,其特征在于,在所述步骤S1之前,所述显微成像方法还包括对样品进行透明化处理。
7.如权利要求1所述的STORM/PALM显微成像方法,其特征在于,所述激发光由连续激光器产生;所述连续激光器的发射波长范围包括400nm~760nm。
8.如权利要求1所述的STORM/PALM显微成像方法,其特征在于,所述激发光和活化光包括以扫描形式实现的贝塞尔光束或艾利光束。
9.一种STORM/PALM显微成像装置,包括载物系统和成像系统,其中:
所述载物系统包括样品池,所述样品池中放置有与样品相对应的折射率匹配溶液,所述样品池具有至少两个开孔;
所述成像系统包括照明光产生模块和成像模块,照明光产生模块用于将激发光和活化光合成照明光以照明样品,所述成像模块包括成像物镜,所述成像物镜嵌于所述样品池的至少两个开孔的任一个,且其前端置于所述折射率匹配液中,以对样品进行成像。
10.如权利要求9所述的STORM/PALM显微成像装置,其特征在于,所述载物系统还包括一位移台,用于对样品进行移动并将样品放置于样品池中。
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