[发明专利]一种小麦面粉不溶性谷蛋白大聚体含量的近红外测定方法

权利要求书

1.一种小麦面粉不溶性谷蛋白大聚体含量的近红外测定方法，其特征在于，具体步骤如下：

1)制备不溶性谷蛋白大聚体样品：

称取20mg面粉样品，加入1.6mL SDS-磷酸缓冲液提取液震荡10min，17000g离心5 min，弃上清；在沉淀中再次加入1.6 mL SDS-磷酸缓冲液提取液，使用超声波细胞粉碎仪提取20s，然后17000 g离心5 min，所获得的上清液即为不溶性谷蛋白大聚体液体样品，备用；

所述SDS-磷酸缓冲液提取液是指：含质量体积比0.5% SDS的0.5M磷酸缓冲液，pH值6.90；

2）使用尼龙膜针头过滤器取步骤1）获得的不溶性谷蛋白大聚体液体样品进行色谱分析，获得化学测定结果；

所述色谱分析是指，采用高效液相色谱仪，流动相为含体积比0.05%三氟乙酸的50%乙腈水溶液，流速0.5 mL/min;

3）取步骤1）获得的不溶性谷蛋白大聚体液体待测样品1.0~1.2 mL，采集光谱数据；光谱扫描区间950~1650nm，扫描次数10次，温度室温，分辨率5nm；

4）采用偏最小二乘方法，对步骤2）获得的化学测定结果和步骤3）获得的光谱数据计算分析，建立预测模型；该模型的决定系数为R²=0.89，模型的定标标准偏差为SECV=36.40；

采用Unscrambler化学计量学软件，结合偏最小二乘法方法建立预测的校准模型；

5）采用一阶导数+S-G平滑的光谱预处理方式消除测量过程中光谱基线漂移对建立预测的校准模型造成的影响，以交互验证的定标标准偏差和所建模型的决定系数R²作为评价预测的校准模型效果的主要参数；

6）采用与步骤1）相同的方法制备待测样品的不溶性谷蛋白大聚体液体样品，利用步骤5）获得的预测的校准模型，并按照步骤3）所述方法对待测样品进行近红外光谱分析，即获得待测样品不溶性谷蛋白大聚体的含量。

2.根据权利要求1所述小麦面粉不溶性谷蛋白大聚体含量的近红外测定方法，其特征在于，步骤1）所述超声波细胞粉碎仪的提取参数为ø3mm探头，输出功10W。

3.根据权利要求1或2所述小麦面粉不溶性谷蛋白大聚体含量的近红外测定方法，其特征在于，步骤3）所述采集光谱数据时，装样硬件为液体石英样品池，厚度为1mm。