[发明专利]一种蛋白A亲和层析介质的应用

权利要求书

1.一种蛋白A亲和层析介质的应用，其特征在于，所述蛋白A亲和层析介质作为层析介质应用于抗体及Fc融合蛋白的分离纯化中；所述蛋白A亲和层析介质以含乙烯基单体的聚合物微球为基质，经亲水性树枝状大分子修饰、活化、偶联蛋白A配基并封尾后得到。

2.如权利要求1所述的蛋白A亲和层析介质的应用，其特征在于，所述蛋白A亲和层析介质为多孔微球介质。

3.如权利要求1所述的蛋白A亲和层析介质的应用，其特征在于，所述亲水性树枝状大分子修饰为在所述聚合物微球表面功能团上接枝亲水性树枝状大分子，所述亲水性树枝状大分子包括但不限于超支化聚乙烯醇或聚甘油类大分子。

4.如权利要求1所述的蛋白A亲和层析介质的应用，其特征在于，所述活化为在所述聚合物微球表面接上功能团，所述功能团包括但不限于环氧、氨基、羧基类功能团。

5.如权利要求1所述的蛋白A亲和层析介质的应用，其特征在于，所述偶联蛋白A配基，为将蛋白A配基偶联到所述聚合物微球活化后的表面功能团上。

6.如权利要求1所述的蛋白A亲和层析介质的应用，其特征在于，所述封尾指利用含有羟基、巯基或氨基类的小分子与偶联蛋白A配基后的聚合物微球表面的活性功能团进行反应，消除未反应的活性功能团。

7.如权利要求1所述的蛋白A亲和层析介质的应用，其特征在于，所述作为基质的含乙烯基单体的聚合物微球是粒径均一、有孔的单分散多孔微球。

8.如权利要求7所述的蛋白A亲和层析介质的应用，其特征在于，所述含乙烯基单体包含至少一种单乙烯基单体，或包含至少一种多乙烯基单体。

9.如权利要求7所述的蛋白A亲和层析介质的应用，其特征在于，所述含乙烯基单体的聚合物微球的直径范围为5～100μm；所述含乙烯基单体的聚合物微球的孔径范围为80～120nm。

10.如权利要求1所述的蛋白A亲和层析介质的应用，其特征在于，所述蛋白A亲和层析介质作为层析介质应用于抗体及Fc融合蛋白的分离纯化时，以20mM PBS+150mM NaCl，pH7.0-pH8.0或50mM磷酸二氢钠+100mMNaAc+150mM NaCl，pH7.0-pH8.0等缓冲液作为平衡相，以50mM Gly，pH3.0-pH4.0等缓冲液作为洗脱相。