[发明专利]产β-丙氨酸的重组菌及其构建方法与应用

权利要求书

1.重组菌的构建方法，包括对受体菌进行A1-A8与B1-B6全部的改造，得到所述重组菌；

A1、敲除所述受体菌的脂肪酸降解转录因子fadR基因或抑制所述fadR基因的表达或抑制所述fadR基因编码的蛋白质的活性；

A2、敲除所述受体菌的β-酮脂酰-ACP合酶II基因fabF基因或抑制所述fabF基因的表达或抑制所述fabF基因编码的蛋白质的活性；

A3、敲除所述受体菌的β-酮脂酰-ACP合酶III基因fabH基因或抑制所述fabH基因的表达或抑制所述fabH基因编码的蛋白质的活性；

A4、敲除所述受体菌的iclR基因或抑制所述iclR基因的表达或抑制所述iclR基因编码的蛋白质的活性；

A5、敲除所述受体菌的sucA基因或抑制所述sucA基因的表达或抑制所述sucA基因编码的蛋白质的活性；

A6、增加所述受体菌中外源烷烃摄入外膜蛋白基因alkL基因编码蛋白质的含量或增强所述alkL基因编码蛋白质的活性；

A7、增加所述受体菌中L-天冬氨酸合成途径中基因编码蛋白质的含量或增强所述L-天冬氨酸合成途径中基因编码蛋白质的的活性；

A8、增加所述受体菌中L-天冬氨酸-α-脱羧酶panD基因编码蛋白质的含量或增强所述panD基因编码蛋白质的活性；

B1、增加所述受体菌中谷氨酸脱氢酶基因gdh基因编码蛋白质的含量或增强所述gdh基因编码蛋白质的活性；

B2、增加所述受体菌中fadL基因编码蛋白质的含量或增强所述fadL基因编码蛋白质的活性；

B3、增加所述受体菌中脂肪酸β氧化途径中基因编码蛋白质的含量或增强所述脂肪酸β氧化途径中基因编码蛋白质的活性；

所述脂肪酸β氧化途径中基因是选自如下一种或多种基因：编码脂酰辅酶A合酶的fadD基因、编码脂酰辅酶A脱氢酶的fadE基因、编码3-羟酰辅酶A脱氢酶的fadB基因、编码3-酮脂酰辅酶A硫解酶的fadA基因、编码3-酮脂酰辅酶A硫解酶的fadI基因、编码3-羟酰辅酶A脱氢酶的fadJ基因和编码短链脂酰辅酶A合酶的fadK基因；

B4、增加所述受体菌中sthA基因编码蛋白质的含量或增强所述sthA基因编码蛋白质的活性；

B5、增加所述受体菌中短链脂肪酸降解途径中基因编码蛋白质的含量或增强所述短链脂肪酸降解途径中基因编码蛋白质的活性；

所述短链脂肪酸降解途径中基因为B5a或B5b：

B5a、短链脂肪酸降解调控基因簇atoSC基因簇中基因；

B5b、短链脂肪酸降解基因簇atoDAEB基因簇中基因；

B6、增加所述受体菌中乙醛酸途径中aceBA基因簇编码蛋白质的含量或增强所述乙醛酸途径中aceBA基因簇编码蛋白质的的活性；

所述受体菌为含有所述fadR基因、所述fabF基因、所述fabH基因、所述iclR基因和所述sucA基因的细菌或真菌。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述受体菌为大肠杆菌；

和/或，所述alkL基因来源于除烃海杆菌（Marinobacter hydrocarbonoclasticus）或/和恶臭假单胞菌（Pseudomonas putida）；

所述L-天冬氨酸合成途径中基因为来源于大肠杆菌（Escherichia coli）或/和真养产碱杆菌（Ralstonia eutropha）或/和铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）的编码天冬氨酸转氨酶的基因aspC基因、编码L-天冬氨酸脱氢酶的基因aspDH基因或/和编码天冬氨酸裂解酶的基因aspA基因；

所述panD基因来源于赤拟谷盗（Tribolium castaneum）或/和大肠杆菌（Escherichiacoli）或/和枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）。