[发明专利]在蛋白纯化过程中灭活病毒的方法

权利要求书

1.一种灭活样品中的一种或多种病毒的方法，其中所述方法包括在纯化靶分子的过程期间，在所述样品从第一单元操作流至第二单元操作时，利用一个或多个在线静态混合器，连续地将所述样品与一种或多种病毒灭活剂混合，其中所述样品的流动在层流范围中，其中在少于10分钟内实现完全的病毒灭活，其中所述层流范围包括低于100的Reynolds数，其中所述第一单元操作包括结合和洗脱色谱，所述第二单元操作包括流过纯化方法，其中所述靶分子为抗体或包含Fc区的蛋白。

2.权利要求1的方法，其中在少于5分钟内实现完全的病毒灭活。

3.权利要求1的方法，其中在少于2分钟内实现完全的病毒灭活。

4.权利要求1的方法，其中在少于1分钟内实现完全的病毒灭活。

5.权利要求1的方法，其中所述结合和洗脱色谱包括A蛋白亲和色谱。

6.权利要求1的方法，其中所述流过纯化方法包含两种或更多种选自以下的基质：活性炭、阴离子交换色谱介质、阳离子交换色谱介质和病毒过滤介质。

7.权利要求1-4中任一项的方法，其中所述样品包含A蛋白洗脱物。

8.权利要求1-4中任一项的方法，其中所述一种或多种病毒灭活剂选自酸、盐和去污剂。

9. 一种灭活一种或多种病毒的方法，所述方法包括：(a) 使包含靶蛋白的样品进行A蛋白亲和色谱方法，从而获得洗脱物；以及(b) 将所述洗脱物连续地转移至在线静态混合器以将一种或多种病毒灭活剂与所述洗脱物混合等于或少于10分钟的一段时间，其中所述洗脱物的流动在层流范围中，其中所述层流范围包括低于100的Reynolds数，从而灭活一种或多种病毒，其中所述靶蛋白为抗体，其中所述方法还包括将来自步骤(b)的产出连续转入流过纯化加工步骤的步骤，其中述流过纯化步骤包含两种或更多种选自以下的基质：活性炭、阴离子交换介质、阳离子交换介质和病毒滤器。

10.权利要求9的方法，其中所述A蛋白亲和色谱方法以分批模式进行。

11.权利要求9的方法，其中所述A蛋白亲和色谱方法以连续模式进行。

12.权利要求11的方法，其中所述A蛋白亲和色谱方法包括连续多柱色谱。

13.权利要求9的方法，其中所述一种或多种病毒灭活剂为酸。