[发明专利]一种1,5‑二氧‑7ab‑甲基‑3aa‑六氢茚满‑4a‑丙酸含量的检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及药物成分的检测，具体涉及一种1,5-二氧-7ab-甲基-3aa-六氢茚满-4a-丙酸含量的检测方法。

背景技术

高效液相色谱是目前应用较多的色谱分析方法，高效液相色谱系统由流动相储液体瓶、输液泵、进样器、色谱柱、检测器和记录器组成。常用的检测器为紫外吸收检测器，是基于溶质分子吸收紫外光的原理设计的。然而对于一些不存在生色基团的化合物，由于无紫外吸收，因此无法使用紫外吸收检测器进行物质检测。

1,5-二氧-7ab-甲基-3aa-六氢茚满-4a-丙酸为白色粉末状固体，结构式如下所示：

其分子式为C₁₃H₁₈O₄，分子量为238.28，分子内含有羧基，呈弱酸性。该化合物是一种重要的甾体药物原料，其有效分离对甾体药物合成意义重大。但是由于该化合物不存在生色基团、无紫外吸收，无法使用紫外吸收检测器对其进行检测，因此目前急需一种能够对1,5-二氧-7ab-甲基-3aa-六氢茚满-4a-丙酸进行有效分离和检测的方法。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种二氧-7ab-甲基-3aa-六氢茚满-4a-丙酸含量的检测方法，以全部或部分解决上述技术问题。

为了解决上述问题，本发明公开了一种1,5-二氧-7ab-甲基-3aa-六氢茚满-4a-丙酸含量的检测方法，包括：

步骤1、配制由乙腈和有机酸水溶液混合而成的流动相，配制不同浓度的1,5-二氧-7ab-甲基-3aa-六氢茚满-4a-丙酸标准品溶液；

步骤2、利用安装有蒸发光散射检测器的高效液相色谱仪以及配制的所述流动相，对不同浓度的1,5-二氧-7ab-甲基-3aa-六氢茚满-4a-丙酸标准品溶液进行检测，根据测得的各浓度1,5-二氧-7ab-甲基-3aa-六氢茚满-4a-丙酸标准品溶液的峰面积的大小和浓度的对应关系，制作标准曲线；

步骤3、对1,5-二氧-7ab-甲基-3aa-六氢茚满-4a-丙酸待测品进行溶液配制，得到待测品溶液，利用所述高效液相色谱仪测得所述待测品溶液中所述1,5-二氧-7ab-甲基-3aa-六氢茚满-4a-丙酸待测品的峰面积；

步骤4、根据所述步骤2制作的标准曲线，确定所述步骤3测得的所述待测品溶液中所述1,5-二氧-7ab-甲基-3aa-六氢茚满-4a-丙酸待测品的峰面积对应的待测品浓度，进一步计算出所述1,5-二氧-7ab-甲基-3aa-六氢茚满-4a-丙酸待测品中1,5-二氧-7ab-甲基-3aa-六氢茚满-4a-丙酸含量。

可选地，配制所述流动相时，所述有机酸水溶液的质量分数为0.05～0.2％；

所述乙腈和所述有机酸水溶液的体积比为40:60～30:70。

可选地，所述有机酸水溶液为甲酸水溶液、乙酸水溶液或丙酸水溶液。

可选地，所述蒸发光散射检测器的雾化温度为30～90℃，漂移管温度为40～90℃，载气流速为1.0～1.8bar。

可选地，所述步骤1中需要配制5～8个不同浓度的1,5-二氧-7ab-甲基-3aa-六氢茚满-4a-丙酸标准品溶液；

所述标准曲线中，根据所述蒸发光散射检测器检测的各浓度1,5-二氧-7ab-甲基-3aa-六氢茚满-4a-丙酸标准品溶液的峰面积的大小与浓度的相关系数大于0.999。

可选地，所述高效液相色谱仪使用的反相色谱固定相为ZORBAX SB-C18，尺寸为250mm×4.6mm。

可选地，所述步骤1还包括：在配制不同浓度的1,5-二氧-7ab-甲基-3aa-六氢茚满-4a-丙酸标准品溶液后，使用0.2μm厚的滤膜对配制的不同浓度的1,5-二氧-7ab-甲基-3aa-六氢茚满-4a-丙酸标准品溶液进行过滤。

与现有技术相比，本发明包括以下优点：

本发明实施例提供了一种1,5-二氧-7ab-甲基-3aa-六氢茚满-4a-丙酸含量的检测方法，由于使用蒸发光散射检测器(ELSD)，因此实现了对无紫外吸收的二氧-7ab-甲基-3aa-六氢茚满-4a-丙酸的检测。利用本发明实施例提供的方法可以实现紫外波段无吸收的样品测定，该方法为一种通用型的分析检测方法，具有广泛的应用前景。