[发明专利]一种用于缓解对虾原肌球蛋白致敏反应的改良蛋白mMet e 1及其制备方法和应用有效
申请号: | 201710255941.3 | 申请日: | 2017-04-18 |
公开(公告)号: | CN107118267B | 公开(公告)日: | 2020-07-24 |
发明(设计)人: | 傅玲琳;王彦波;饶志恒;周瑾茹 | 申请(专利权)人: | 浙江工商大学 |
主分类号: | C07K14/435 | 分类号: | C07K14/435;C12N15/70;A23L33/18;A61K38/17;A61P37/08 |
代理公司: | 杭州天勤知识产权代理有限公司 33224 | 代理人: | 黄平英 |
地址: | 310018 浙江*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 缓解 对虾 肌球蛋白 反应 改良 蛋白 mmet 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种用于缓解对虾原肌球蛋白致敏反应的改良蛋白mMet e 1,其特征在于,其氨基酸序列如SEQ ID NO:6所示。
2.一种如权利要求1所述改良蛋白mMet e 1的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)对照新对虾属(
(2)通过mMet e 1的氨基酸序列逆向转录翻译得到改良蛋白mMet e 1氨基酸序列的cDNA序列并进行合成;
(3)将所得cDNA与载体质粒通过限制性内切酶处理并结合,获得改良蛋白mMet e 1重组质粒载体;
(4)将所得重组质粒载体导入宿主菌,培养经转化的宿主菌,使其表达改良蛋白mMet e1;
(5)经纯化柱纯化所得的改良蛋白,得到改良蛋白mMet e 1标准品。
3.根据权利要求2所述制备方法,其特征在于,所述四种非致敏性海洋鱼类分别为大西洋鲑鱼、点带石斑鱼、鳜鱼以及金枪鱼。
4.根据权利要求2所述制备方法,其特征在于,所述限制性内切酶为EcoRV及HindⅢ。
5.根据权利要求2所述制备方法,其特征在于,所述载体质粒为Pet30(a)+。
6.根据权利要求2所述制备方法,其特征在于,所述宿主菌为大肠杆菌BL21(DE3)。
7.根据权利要求2所述制备方法,其特征在于,纯化所用纯化柱为HisPur Cobat SpinColumn。
8.一种如权利要求1所述改良蛋白mMet e 1在制备用于缓解对虾原肌球蛋白致敏反应的药物中的应用。
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