[发明专利]一种用于缓解对虾原肌球蛋白致敏反应的改良蛋白mMet e 1及其制备方法和应用有效

专利信息
申请号: 201710255941.3 申请日: 2017-04-18
公开(公告)号: CN107118267B 公开(公告)日: 2020-07-24
发明(设计)人: 傅玲琳;王彦波;饶志恒;周瑾茹 申请(专利权)人: 浙江工商大学
主分类号: C07K14/435 分类号: C07K14/435;C12N15/70;A23L33/18;A61K38/17;A61P37/08
代理公司: 杭州天勤知识产权代理有限公司 33224 代理人: 黄平英
地址: 310018 浙江*** 国省代码: 浙江;33
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摘要:
搜索关键词: 一种 用于 缓解 对虾 肌球蛋白 反应 改良 蛋白 mmet 及其 制备 方法 应用
【权利要求书】:

1.一种用于缓解对虾原肌球蛋白致敏反应的改良蛋白mMet e 1,其特征在于,其氨基酸序列如SEQ ID NO:6所示。

2.一种如权利要求1所述改良蛋白mMet e 1的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:

(1)对照新对虾属(Metapenaeus)原肌球蛋白Met e1抗原特异性表位氨基酸序列与四种非致敏性海洋鱼类原肌球蛋白序列,进行氨基酸序列分析,重新设计其抗原表位氨基酸残基序列并得到改良蛋白mMet e 1氨基酸序列;

(2)通过mMet e 1的氨基酸序列逆向转录翻译得到改良蛋白mMet e 1氨基酸序列的cDNA序列并进行合成;

(3)将所得cDNA与载体质粒通过限制性内切酶处理并结合,获得改良蛋白mMet e 1重组质粒载体;

(4)将所得重组质粒载体导入宿主菌,培养经转化的宿主菌,使其表达改良蛋白mMet e1;

(5)经纯化柱纯化所得的改良蛋白,得到改良蛋白mMet e 1标准品。

3.根据权利要求2所述制备方法,其特征在于,所述四种非致敏性海洋鱼类分别为大西洋鲑鱼、点带石斑鱼、鳜鱼以及金枪鱼。

4.根据权利要求2所述制备方法,其特征在于,所述限制性内切酶为EcoRV及HindⅢ。

5.根据权利要求2所述制备方法,其特征在于,所述载体质粒为Pet30(a)+。

6.根据权利要求2所述制备方法,其特征在于,所述宿主菌为大肠杆菌BL21(DE3)。

7.根据权利要求2所述制备方法,其特征在于,纯化所用纯化柱为HisPur Cobat SpinColumn。

8.一种如权利要求1所述改良蛋白mMet e 1在制备用于缓解对虾原肌球蛋白致敏反应的药物中的应用。

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