[发明专利]急性肝胰腺坏死综合症专用检测试剂盒及其制备方法

权利要求书

1.一种检测急性肝胰腺坏死综合症的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括：酶标板和酶标检测抗体；

其中，所述酶标板上包被有抗急性肝胰腺坏死综合症的特异性卵黄抗体，所述酶标检测抗体为酶标记的抗急性肝胰腺坏死综合症的多克隆抗体；

所述特异性卵黄抗体为用pirA和pirB蛋白免疫产蛋禽类后提取抗急性肝胰腺坏死综合症的特异性卵黄抗体；

所述pirA蛋白的氨基酸序列包含如SEQ ID NO.1所示的片段；

所述pirB蛋白的氨基酸序列包含如SEQ ID NO.2所示的片段。

2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述酶标检测抗体为酶标记的鼠源抗PirA和PirB毒素蛋白的多克隆抗体。

3.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述酶标检测抗体为用辣根过氧化物酶或碱性磷酸酶标记的检测抗体。

4.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述酶标检测抗体为辣根过氧化物酶标记的检测抗体。

5.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括样品稀释液和洗涤液。

6.根据权利要求5所述的试剂盒，其特征在于，所述样品稀释液为pH 7-7.5的磷酸盐缓冲液。

7.根据权利要求6所述的试剂盒，其特征在于，所述样品稀释液为pH 7.2的磷酸盐缓冲液。

8.根据权利要求5所述的试剂盒，其特征在于，所述洗涤液为pH 9-10的碳酸盐缓冲液。

9.根据权利要求8所述的试剂盒，其特征在于，所述洗涤液为pH 9.6的碳酸盐缓冲液。

10.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括封闭液和终止液。

11.根据权利要求10所述的试剂盒，其特征在于，所述封闭液为含1％牛血清蛋白的洗涤液。

12.根据权利要求10所述的试剂盒，其特征在于，所述终止液为硫酸溶液。

13.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括酶底物溶液。

14.根据权利要求13所述的试剂盒，其特征在于，所述酶底物溶液包含邻苯二胺或3,3’,5,5’-四甲基联苯胺。

15.根据权利要求14所述的试剂盒，其特征在于，所述酶底物溶液为3,3’,5,5’-四甲基联苯胺。

16.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括阳性对照和阴性对照。

17.根据权利要求16所述的试剂盒，其特征在于，所述阳性对照为包含纯化后pirA和pirB毒素蛋白的溶液。

18.根据权利要求16所述的试剂盒，其特征在于，所述阴性对照为牛血清白蛋白溶液。

19.一种如权利要求1-18任一项所述的检测急性肝胰腺坏死综合症的试剂盒的制备方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

(1)用pirA和pirB蛋白免疫产蛋禽类后提取抗急性肝胰腺坏死综合症的特异性卵黄抗体；

(2)用所述特异性卵黄抗体包被空白酶标板，得到包被的酶标板；

(3)将所述包被的酶标板与酶标检测抗体组合成试剂盒；

任选地，还包括将样品稀释液、洗涤液、封闭液、酶底物溶液、终止液、阳性对照和阴性对照组合到试剂盒中。