[发明专利]一种检测特鲁曲班光学异构体含量的方法

权利要求书

1.一种检测特鲁曲班光学异构体含量的方法，其特征在于：包括以下步骤：

1)样品的准备：将生物样品或生物样品的匀浆液与乙腈混合以沉淀蛋白，通过离心分离沉淀，将离心所得上清液吹干，得到待分析样品；或将非生物样品用乙腈溶解、定容后得到待分析样品；

2)确定手性色谱分离条件：根据(R)-特鲁曲班和(S)-特鲁曲班的分离度≥1.5的要求，手性高效液相色谱分离中采用的流动相为甲醇或乙腈与水、易挥发性缓冲盐以及易挥发性酸的混合溶液，混合溶液中所述缓冲盐的浓度为0.1-10mM，所述酸的体积分数为0.01-0.5％，甲醇或乙腈与水的体积比为1.5-4:1；柱温为5-50℃；进样量为1-10μL；流动相流速为0.1-1mL/min，等度洗脱；

3)确定质谱/质谱工作条件：采用三重四级杆质谱以及多反应监测扫描模式；母离子和子离子分别为408.1和223.1；锥孔电压为30-50V；碰撞能量为35-50eV；

4)光学异构体含量测定：对待分析样品进行手性高效液相色谱-质谱/质谱分析，然后利用外标法计算样品中的(R)-特鲁曲班和(S)-特鲁曲班的含量。

2.根据权利要求1所述一种检测特鲁曲班光学异构体含量的方法，其特征在于：所述生物样品选自血浆、组织液、体液或生物组织。

3.根据权利要求1所述一种检测特鲁曲班光学异构体含量的方法，其特征在于：所述非生物样品为环境监测物或特鲁曲班的制剂。

4.根据权利要求1所述一种检测特鲁曲班光学异构体含量的方法，其特征在于：所述步骤1)中，沉淀蛋白所用乙腈的体积为生物样品体积的至少4倍。

5.根据权利要求1所述一种检测特鲁曲班光学异构体含量的方法，其特征在于：所述手性高效液相色谱采用反相涂敷型或键合型手性色谱柱，手性填料包括多糖衍生物类填料。

6.根据权利要求1所述一种检测特鲁曲班光学异构体含量的方法，其特征在于：所述缓冲盐选自甲酸铵、乙酸铵、碳酸铵或碳酸氢铵，所述酸选自甲酸、乙酸或三氟乙酸。

7.根据权利要求1所述一种检测特鲁曲班光学异构体含量的方法，其特征在于：所述质谱/质谱的工作条件还包括：驻留时间为0.12-0.16s；ESI离子源温度为100-130℃；干燥气的温度为300-450℃，干燥气的流速为400-700L/h；毛细管电压为2.0-3.5KV。

8.根据权利要求1所述一种检测特鲁曲班光学异构体含量的方法，其特征在于：所述外标法采用的标准曲线的范围为0.1-100ng/mL。