[发明专利]一种用于护肤品的蚕丝素低聚肽制备方法

权利要求书

1.一种用于护肤品的蚕丝素低聚肽制备方法，其特征在于包括以下制备步骤：

(1)脱胶：取蚕茧用0.5-0.8％Na₂CO₃溶液浸渍脱胶30-40min，然后用清水洗涤，重复浸渍、清洗2-3遍，自然晾干或烘干，得到脱胶蚕丝，所述蚕茧与Na₂CO₃溶液的固液质量比为1:200；

(2)盐解：将步骤(1)所得脱胶蚕丝放入50-60％CaCl₂的溶液中加热至沸腾后溶解20-30min，冷却后离心20-30min，得到盐解液，所述脱胶蚕丝与CaCl₂溶液的固液质量比为1:20；

(3)透析：将步骤(2)所得盐解液用截留分子量15000-10000Da的透析袋流水透析2-3天，得到低分子量丝素溶液；

(4)双酶解：按固液质量比(100-110):1将复合酶与步骤(3)所得低分子量丝素溶液混合，在pH8-8.5下酶解60-70min，得到丝素酶解液，所述复合酶是由碱性蛋白酶和放线菌酶按质量比碱性蛋白酶:放线菌酶＝(2.0-2.5):1混合而成；

(5)再透析：将步骤(4)所得丝素酶解液用截留分子量1500-300Da的透析袋流水透析2-3天，获得低分子量丝素酶解液；

(6)膜分离：对步骤(5)所得低分子量丝素酶解液进行浓缩，用双蒸水进行梯度洗脱，然后用膜分离柱进行分离、收集组分，即获得分子量在800-500Da的蚕丝素低聚肽溶液；

(7)将步骤(6)所得蚕丝素低聚肽溶液经-80℃冷冻干燥，得到蚕丝素低聚肽粉。

2.根据权利要求1所述的一种用于护肤品的蚕丝素低聚肽制备方法，其特征在于步骤(1)所述烘干温度为60-70℃。

3.根据权利要求1所述的一种用于护肤品的蚕丝素低聚肽制备方法，其特征在于步骤(2)所述离心转速为3500-4000r/min。

4.根据权利要求1所述的一种用于护肤品的蚕丝素低聚肽制备方法，其特征在于步骤(4)所述碱性蛋白酶与放线菌酶的活力单位均为10000U。

5.根据权利要求1所述的一种用于护肤品的蚕丝素低聚肽制备方法，其特征在于步骤(6)所述膜分离柱为葡聚糖凝胶层析柱Sephadex G-15。