[发明专利]一种用于护肤品的蚕丝素低聚肽制备方法

说明书

本发明公开了一种用于护肤品的蚕丝素低聚肽制备方法，包括以下步骤：(1)脱胶：将蚕茧用0.5‑0.8％Na₂CO₃浸渍、水洗和干燥；(2)盐解：用50‑60％CaCl₂，沸水中溶解，冷却后离心，上清液透析，得到小分子丝素蛋白溶液；(3)双酶解：用碱性蛋白酶和放线菌酶进行双酶解处理、离心，上清液透析，得到低分子量蚕丝素溶液；(4)膜分离：用葡聚糖凝胶层析柱Sephadex G‑15分离，收集组分，获得蚕丝素低聚肽溶液；(5)干燥保存：将丝素低聚肽溶液进行超低温冷冻干燥即得蚕丝素低聚肽粉。本发明的蚕丝素低聚肽制备方法操作简便，提取率93％以上，适用于护肤品及化妆品的添加原料。

技术领域

本发明涉及一种蚕丝蛋白的制备方法，具体涉及一种用于护肤品的蚕丝素低聚肽制备方法，属于生物高分子材料技术领域。

背景技术

蚕丝是高分子动物蛋白(丝素蛋白)，富含18种氨基酸，具有保湿、透气、抗菌、防静电、防紫外线等优良特性。早在明代，李时珍在其医学巨著《本草纲目》中就记载了蚕丝的美容护肤作用。随着科技的进步与发展，人们对蚕丝蛋白的认识越来越深入，蚕丝新用途的研究与开发受到人们的高度关注。

天然蚕丝素蛋白分子量较大，约350000Da(道尔顿)，以纤维状存在，不适合直接用于护肤品或化妆品的原料。目前常规的方法，是将生丝原料(蚕茧或废丝)通过精炼除胶后置于溴化锂、硝酸镁和氯化钙之类的高浓度溶解性盐中加热溶解，然后进行过滤和透析脱盐等处理过程，使得丝纤维的结晶结构受到破坏，成为丝蛋白水溶液。所得的丝素蛋白分子量在100000Da以上，而且重金属含量较高，直接用于护肤品原料，一方面丝素蛋白分子量较大，肌肤的吸收效率低，影响美容护肤效果；另一方面，由于重金属含量较高影响到产品的使用安全，如中国专利CN201510071886.3公开的“一种家蚕丝素蛋白溶液制备及鉴定方法”，中国专利CN201410352789.7公开了的“一种阳离子化丝素蛋白及其制备方法”等。

有报道利用蛋白酶水解蚕丝蛋白，主要有碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胃蛋白酶等对蚕丝蛋白进行酶解，如，徐莹、何国庆“Bacillus sp.EL31410产弹性蛋白水解丝素蛋白特性的研究”(食品与发酵工业，2008，6:28-29)报道，弹性蛋白酶水解丝素蛋白的最适作用温度是45-55℃，最适pH是9.0，水解产物的相对分子质量主要在1000D以上，以大分子的多肽物质为主，技术工艺要求高，流程复杂，可控程度低。代君君等“木瓜蛋白酶的降解作用研究”(北方蚕业，2015，09：11-13)表明pH8-9、温度60-70℃，木瓜蛋白酶的活性为20-25U时丝素蛋白水解效果较好，酶的作用时间越长效果越好，但所得产物为混合物，有氨基酸、小肽、多肽及部分大分子蛋白质。张桂征等“一株放线菌对丝素纤维的降解作用”(蚕业科学，2007，33:241-245)，培养42d时，丝素纤维已完全降解，所得产物以小分子的氨基酸为主，寡肽含量比例在10％以下。研究表明，小分子或氨基酸类物质有利于胃肠道的吸收，低聚肽(分子量800-500Da)分子有利于肌肤的吸收。为开发蚕丝美容护肤品，蚕丝低聚肽制备技术尤为关键。

发明内容

解决的技术问题：针对现有技术的不足，本发明提供了一种用于护肤品的蚕丝素低聚肽制备方法，运用碱性蛋白酶和放线菌酶双酶解，并结合膜分离技术，通过严格控制用酶量和酶解条件制备蚕丝素低聚肽。

技术方案：本发明提供的用于护肤品的蚕丝素低聚肽制备方法，包括以下制备步骤：

(1)脱胶：取蚕茧用0.5-0.8％Na₂CO₃溶液浸渍脱胶30-40min，然后用清水洗涤，重复浸渍、清洗2-3遍，自然晾干或烘干，得到脱胶蚕丝，所述蚕茧与Na₂CO₃溶液的固液质量比为1:200，；