[发明专利]雷公藤红素适配子偶合物及其制备方法和应用

说明书

本发明涉及制药领域，具体涉及一种雷公藤红素适配子偶合物及其制备方法和应用，所述雷公藤红素适配子偶合物具有以下结构(I)：其中，M为AS1411。本发明雷公藤红素适配子偶合物，具有更好的水溶性、更高的生物利用度、更低肝脏毒副作用、抗癌活性强的特点。其合成工艺更加简单，合成条件更为宽松，大大降低了合成难度，节约了成本，分离纯化相对容易，产率更高，更容易实现产业化，效果更好。

技术领域

本发明涉及药物领域，具体涉及一种雷公藤红素适配子偶合物及其制备方法和应用。

背景技术

雷公藤，又名断肠草，卫矛科雷公藤属木质藤本植物，分布于长江流域以南及西南地区，性寒，味苦，有大毒。雷公藤红素(Celastrol)是从传统中药雷公藤的根皮部位分离得到的醌甲基三萜类物质，又名雷红素，是雷公藤中除了雷公藤甲素(Triptolide)之外的又一主要有效成分。

雷公藤红素(Celastrol)的化学结构式如下：

雷公藤红素为醌甲基三萜类化合物、红色针状晶体，不溶于水，易溶于多种有机溶剂，在二甲基亚砜中溶解度10g·L^-1，也可溶于无水乙醇、甲醇等有机溶剂；具有抗炎、免疫抑制、抗生育、抗肿瘤等诸多活性，广泛应用于治疗类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮、强直性脊柱炎和肿瘤等。

雷公藤红素还具有极其显著的抗肿瘤活性。研究表明，雷公藤红素可体外可诱导多种肿瘤细胞凋亡，包括卵巢癌、乳腺癌、结肠癌、口腔癌、胃癌等，体内可抑制肿瘤生长和肿瘤细胞转移，包括血液学肿瘤、恶性肿瘤和实体瘤。体外研究表明，雷公藤红素在极低浓度(2-10ng/ml)下即可有效抑制肿瘤细胞增殖。除此之外，雷公藤红素还可对抗肿瘤耐药，同时提高肿瘤细胞对其它抗癌药物的敏感性，与化疗药物和放射疗法相结合发挥协同效应。雷公藤红素对血管的生成有明显的抑制作用，有可能成为有效的血管生成抑制剂。有学者研究表明，红素可以通过下调bFGF的蛋白表达有效抑制血管内皮细胞株(ECV)增殖，从而抑制ECV体外迁移和小管形成；雷公藤红素(celastrol)可通过控制癌细胞的蛋白酶体进而诱发癌细胞凋亡的抑制剂，体外的抗癌机制研究证实：雷公藤红素能够使SHG-44细胞Bax表达增加，bcl-2表达下降，从而促进肿瘤细胞凋亡，有效地抑制裸鼠前列腺癌的增生；还有文献报道，雷公藤红素可将人结肠癌细胞、人急性早幼粒白血病细胞、多发性骨髓瘤细胞等细胞周期阻滞于G₀/G₁期，且有学者认为雷公藤红素是通过调P-Akt和Cyclin D₁蛋白表达而诱导细胞周期阻滞于G₀/G₁期，可见雷公藤红素是种有潜力的细胞周期特异性药物。

尽管雷公藤红素具有显著的抗肿瘤活性，但其本身水溶性差、生物利用度低、毒性较强、治疗窗窄等缺陷限制了其临床应用。

适配子(aptamer)是一类具有治疗作用的寡核苷酸，能与靶蛋白发生特异性、高亲和力的结合，其功能类似单克隆抗体。可通过指数富集配基的系统进化技术(SELEX)进行体外筛选、扩增和富集。适配子在实际应用中具有许多优点：高亲和力和高特异性；分子量小，稳定性好，对环境温度不敏感，易保存；易合成，易修饰，提高了其在临床诊断和治疗中的应用。适配子的易标记性使其在诊断中更具灵活性，可以利用核酸适配子检测蛋白、细胞及分子成像，具有良好的敏感性和特异性。适配子可直接作为药物治疗疾病，部分适配子在与其对应的靶序列特异结合时，结合位点为蛋白的功能区域，蛋白功能将会被抑制。适配子还可作为药物运输载体，将药物与适配子相连使之具有细胞选择性，避免对正常组织和细胞的毒副作用。

AS1411是一种富含鸟嘌呤结构的寡聚核苷酸(GROs)，能形成稳定的G-四联体结构，有效对抗细胞内核酸酶降解，序列为5’-GGTGGTGGTGGTTGTGGTGGTGGTGG-3’。