[发明专利]基于UHPLC串联高分辨质谱应用代谢组学技术区分真假日照绿茶的分析方法

权利要求书

1.一种基于UHPLC串联四极杆-轨道阱高分辨质谱应用代谢组学技术区分真假日照绿茶的分析方法，其特征是，包括以下步骤：

将日照绿茶样品和待测的绿茶样品分别采用有机溶剂进行前处理后，应用超高效液相色谱-四极杆-轨道阱高分辨质谱方法实现对前处理后的样品中的化学成分的分离与测定，然后对得到日照绿茶样品与待测绿茶样品的UHPLC-MS原始数据进行预处理，最后应用多元统计分析方法主成分分析模型区分待测绿茶样品是否为日照绿茶；

所述日照绿茶样品选择岚山区的茶叶、五莲县的茶叶、东港区的茶叶、莒县的茶叶中的一种或多种；

所述前处理采用的有机溶剂是甲醇水溶液，所述甲醇水溶液中甲醇的体积分数为75～80％；

超高效液相色谱条件为：采用C18色谱柱；A相：0.1％甲酸水溶液，B相：0.1％甲酸乙腈溶液，梯度洗脱流程：0-2.5min95％A，2.5-3min95％-91％A，3-4min91％-80％A，4-5.5min80％-70％A，5.5-6.5min70％-65％A，6.5-8min65％-50％A，8-8.75min50％-30％A，8.75-9.75min30％-15％A，9.75-11.75min15％-10％A，11.75-14min10％-1％A，14-16.5min1％A，16.5-17.5min1％-95％A，17.5-20min95％；流速：0.2～0.5mL/min，柱温30～37℃；

正离子模式，分辨率，70000；鞘气流速，40个单位；辅助气流速，10个单位；反吹气流速，0个单位；喷雾电压，3.1Kv；毛细管温度，320℃；扫描范围，m/z：75-1125；扫面模式：全扫描；

得到日照绿茶样品与待测绿茶样品的UHPLC-MS原始数据采用Compound Discover软件进行预处理，该预处理是指对总离子流图原始数据中的色谱峰的提取、峰对齐、去噪音处理，得到各个峰的保留时间、峰高、峰面积和质荷比数据；然后通过多元统计分析方法PCA得分图的形式对区分结果进行展示。

2.如权利要求1所述的分析方法，其特征是：所述甲醇水溶液中甲醇的体积分数为75％。

3.如权利要求1所述的分析方法，其特征是：样品前处理过程包括：将绿茶样品粉碎，与有机溶剂混合，超声，离心，过有机滤膜，得到可上机检测的样品。

4.如权利要求3所述的分析方法，其特征是：超声时间为10～30min；

离心条件：800～1200rpm离心4～8min。

5.如权利要求4所述的分析方法，其特征是：超声时间为20min；

离心条件：1000rpm离心5min。

6.如权利要求3所述的分析方法，其特征是：有机滤膜的孔径为0.20～0.25μm；

样品与有机溶剂的添加比例为1g：300～400mL。

7.如权利要求6所述的分析方法，其特征是：有机滤膜的孔径为0.22μm；

样品与有机溶剂的添加比例为1g：350mL。

8.如权利要求1所述的分析方法，其特征是：甲酸水溶液中甲酸的体积分数为0.1％，甲酸乙腈溶液中甲酸的体积分数为0.1％；流速为0.3mL/min；柱温35℃；进样量2微升。