[发明专利]基于UHPLC串联高分辨质谱应用代谢组学技术区分真假日照绿茶的分析方法

说明书

本发明公开了一种基于UHPLC串联高分辨质谱应用代谢组学技术区分真假日照绿茶的分析方法，将日照绿茶样品和待测的绿茶样品分别采用有机溶剂进行前处理后，应用超高效液相色谱‑四极杆‑轨道阱高分辨质谱方法实现对前处理后的样品中的化学成分的分离与测定，然后对得到日照绿茶样品与待测绿茶样品的UHPLC‑MS原始数据进行预处理，最后应用多元统计分析方法主成分分析模型区分待测绿茶样品是否为日照绿茶。本发明的分析结果以PCA得分图的形式展示，本领域技术人员能够直观的判别其真假情况，无需再进行相关验证和分析，可以得到真假结论，检测结果准确可靠。

技术领域

本发明属于茶业品质检测技术领域，具体涉及一种基于UHPLC串联高分辨质谱应用代谢组学技术区分真假日照绿茶的分析方法。

背景技术

代谢组学是对一个生物系统的给定时间和条件下所有小分子代谢物质的定性定量分析,从而定量描述生物内源性代谢物质的整体及其对内因和外因变化应答规律的科学。代谢组学研究的对象是相对分子质量1000以内的小分子代谢产物，可以系统、细致的了解和认识生命机体的活动规律和代谢过程。

代谢组学的主要研究思想是“全局观点”，注重对生物代谢物的整体情况进行研究，更能反映生物的整体动态情况。代谢组学方法为生命科学的发展提供了有力的现代化实验技术手段,同时也为实践提供了新的技术支持与保障。

茶叶品质一般与色、香、味、形等因素有关，这些因素受海拔、纬度、光照、温度、湿度、栽培过程中的灌水及施肥等影响较大。而茶叶中有水分、生物碱、酶、茶多酚、维生素和氨基酸等上百种化学成分，这些化学成分之间也是相互联系的，它们共同决定着茶叶的品质，传统意义上的依靠感官的茶叶品质鉴定方式无法对茶叶中的化学物质进行定性定量测定，太过于主观，逐渐不适应当下茶业经济的发展，很难让人信服。

日照绿茶产于山东省日照市，日照是世界茶学家公认的三大海绿茶城市之一(另两个分别为韩国宝城和日本静冈)。日照市地处山东省东南部，东临黄海，属暖温带湿润季风气候，光照充足，雨量充沛，境内山地丘陵土壤呈微酸性，属黄棕壤土，含有丰富的有机质和微量元素，优越的沿海气候条件和优良的环境，孕育了日照绿茶“叶片厚、滋味浓、香气高、耐冲泡”的独待品质，冲泡后汤色黄绿明亮、栗香浓郁、回味甘醇，被誉为“江北第一茶”。2006年3月，国家质检总局批准对日照绿茶实施地理标志产品保护。因此，建立一种区分日照绿茶的方法有很强的实用意义。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明提供一种基于UHPLC串联四极杆-轨道阱高分辨质谱应用代谢组学技术区分真假日照绿茶的分析方法，该分析方法能够有效区分真日照绿茶和低价绿茶。

本发明采用的技术方案如下：

本发明提供一种基于UHPLC串联四极杆-轨道阱高分辨质谱应用代谢组学技术区分真假日照绿茶的分析方法，包括以下步骤：

将日照绿茶样品和待测的绿茶样品分别采用有机溶剂进行前处理后，应用超高效液相色谱-四极杆-轨道阱高分辨质谱方法实现对前处理后的样品中的化学成分的分离与测定，然后对得到日照绿茶样品与待测绿茶样品的UHPLC-MS原始数据进行预处理，最后应用多元统计分析方法主成分分析(PCA)模型区分待测绿茶样品是否为日照绿茶。

本发明中，所述日照绿茶样品选择岚山区的茶叶、五莲县的茶叶、东港区的茶叶、莒县的茶叶中的一种或多种。为了能够得到有效区分真假日照绿茶，优先可以选用这四种茶叶样品。

本发明中，所述前处理采用的有机溶剂是甲醇水溶液，优选的，所述甲醇水溶液中甲醇的体积分数为75～80％，最优选的为75％。

本发明中，样品前处理过程包括：将绿茶样品粉碎，与有机溶剂混合，超声，离心，过有机滤膜，得到可上机检测的样品。