[发明专利]马铃薯复配主食中马铃薯含量的测定方法

权利要求书

1.一种马铃薯复配主食中马铃薯含量的测定方法，其特征在于，包括：

步骤一，基于荧光定量PCR技术检测待检测马铃薯复配主食中是否含有如SEQ ID NO：1所示的特异碱基序列中的部分序列，采用的荧光定量PCR的引物为SEQ ID NO：2和3所示的碱基序列，其具体步骤包括：

1.1)取标准阳性样品，利用如SEQ ID NO：2和3所示的碱基序列进行荧光定量PCR反应，并绘制标准阳性样品的马铃薯质量百分比的对数值与循环阈值Ct值之间的标准曲线和溶解曲线；

1.2)取待检测马铃薯复配主食，利用如SEQ ID NO：2和3所示的碱基序列进行荧光定量PCR反应，并绘制待检测马铃薯复配主食的马铃薯质量百分比的对数值与循环阈值Ct之间的扩增曲线和溶解曲线；

1.3)比较待测马铃薯复配主食的扩增曲线和溶解曲线各自分别与标准阳性样品的标准曲线和溶解曲线的相似性，若待测马铃薯复配主食的扩增曲线与标准阳性样品的标准曲线基本相同，且Ct≤34.5，同时，待测马铃薯复配主食的溶解曲线与标准阳性样品的溶解曲线基本相同，且Tm值介于78.19℃～78.59℃之间，则判定所述待测马铃薯复配主食中含有马铃薯全粉或薯泥；

若该待测马铃薯复配主食中含有马铃薯全粉或薯泥，则进入步骤二；

步骤二，基于近红外光谱技术测定待测马铃薯复配主食中的马铃薯全粉或薯泥含量：

2.1)取多个样品，该多个样品中的马铃薯全粉或薯泥含量已知，利用近红外光谱仪于扫描范围890～1100nm内扫描每个样品，经过处理得到每个样品的近红外光谱特征峰；

2.2)利用建模软件将该多个样品的近红外光谱特征峰与马铃薯全粉或薯泥含量之间进行分析，经过多元散射校正进行近红外光程的校正以消除光程差异，同时采用卷积平滑一阶导数对光谱进行平滑预处理，在全光谱850-1100nm范围内，采用偏最小二乘法合并交互验证的方法，建立马铃薯的近红外光谱特征峰与马铃薯全粉或薯泥含量的定标方程；

2.3)利用近红外扫描仪于扫描范围890～1100nm内扫描待测马铃薯复配主食，经过处理得到待测马铃薯复配主食的近红外光谱特征峰，基于所述定标方程计算得到待测马铃薯复配主食中的马铃薯全粉或薯泥的含量。

2.如权利要求1所述的马铃薯复配主食中马铃薯含量的测定方法，其特征在于，所述马铃薯全粉包括马铃薯熟全粉和马铃薯生全粉。

3.如权利要求1所述的马铃薯复配主食中马铃薯含量的测定方法，其特征在于，步骤2.1)中，所述多个样品的马铃薯全粉或薯泥含量从0％至100％，且每个样品中的马铃薯全粉或薯泥的含量均不相同，其中任意两个样品的马铃薯全粉或薯泥的含量的差值不小于1％。

4.如权利要求1所述的马铃薯复配主食中马铃薯含量的测定方法，其特征在于，步骤2.1)和2.3)中，利用近红外扫描仪扫描后得到某一类样品的原始光谱，采用MSC和S-G-1^st平滑处理分别对原始光谱进行预处理得到所述近红外光谱特征峰。

5.如权利要求1所述的马铃薯复配主食中马铃薯含量的测定方法，其特征在于，步骤2.1)中，每个样品利用近红外光谱仪重复扫描3次。

6.如权利要求1所述的马铃薯复配主食中马铃薯含量的测定方法，其特征在于，步骤2.2)中，所述建模软件为Grams，所述定标方程中，马铃薯全粉或薯泥的最佳主因子数为9。

7.如权利要求1至5任一所述的马铃薯复配主食中马铃薯含量的测定方法，其特征在于，在所述步骤二中，基于近红外光谱技术测定待检测马铃薯复配主食中的马铃薯全粉或薯泥含量之前，首先将马铃薯复配主食根据主成份和加工工艺的不同而分成若干类，基于所述近红外光谱技术测定待检测同一类马铃薯复配主食中的马铃薯全粉或薯泥含量。