[发明专利]水稻地方品种薄稻穗瘟抗性基因的分子标记引物及其应用

权利要求书

1.水稻薄稻穗瘟抗性基因Pb-bd1的分子标记，其特征在于所述的分子标记选自BS23、RM7654中的任意一种；所述的分子标记BS23的上游引物为BS23-F：SEQ ID NO.1，下游引物为BS23-R：SEQ ID NO.2，扩增产物大小为114bp；所述的分子标记RM7654的上游引物为RM7654-F：SEQ ID NO.3，下游引物为RM7654-R：SEQ ID NO.4，扩增产物大小为155bp。

2.权利要求1所述的水稻薄稻穗瘟抗性基因Pb-bd1的分子标记引物，其特征在于所述的分子标记BS23的上游引物为BS23-F：SEQ ID NO.1，下游引物为BS23-R：SEQ ID NO.2，扩增产物大小为114bp；所述的分子标记RM7654的上游引物为RM7654-F：SEQ ID NO.3，下游引物为RM7654-R：SEQ ID NO.4，扩增产物大小为155bp。

3.权利要求1所述的分子标记在鉴别水稻穗瘟抗性基因Pb-bd1中的应用。

4.权利要求2所述的分子标记引物在鉴别水稻穗瘟抗性基因Pb-bd1中的应用。

5.权利要求2所述的分子标记引物在鉴别抗稻瘟病水稻中的应用。

6.一种快速鉴别水稻穗瘟抗性基因Pb-bd1存在与否的方法，其特征在于包含如下步骤：

（1）取水稻样品，提取水稻样品基因组DNA；

（2）利用权利要求2所述的分子标记引物中的任意一对或两对，对所述的水稻样品基因组DNA进行PCR扩增，PCR扩增产物在8% 非变性聚丙烯酰胺凝胶上进行电泳检测，如果扩增出对应大小的分子标记片段，标志着Pb-bd1基因的存在。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于所述的PCR扩增的反应体系为： 10×含Mg²⁺的缓冲液 1.0 µl，4 pmol/µl的所述分子标记引物对1 µl，2.5 mM dNTPs 0.2 µl，5 U/µl的Taq酶0.1 µl，10 ng/µl的水稻样品基因组模板DNA 1 µl，加水至10 µl；反应程序为：DNA94 ℃预变性 5 分钟后； 94 ℃变性40 秒，60 ℃退40秒，72 ℃延伸展40秒分钟，循环30次；最后72 ℃延伸10分钟。