[发明专利]一种重组的长牡蛎CgC1qDC-3蛋白的应用

权利要求书

1.一种重组的长牡蛎CgC1qDC-3蛋白的应用，其特征在于：重组CgC1qDC-3蛋白在制备高亲和力特异识别脂多糖LPS的药物中的应用；所述重组的长牡蛎CgC1qDC-3蛋白序列如SEQ ID NO .1所示。

2.按权利要求1所述的重组的长牡蛎CgC1qDC-3蛋白的应用，其特征在于：

1）以长牡蛎cDNA为模板，采用P1和P2为引物进行PCR扩增，待用；

2）PCR扩增产物与pMD19-T载体连接，而后将连接产物与原核表达载体经EcoRI，BamHI双酶切后经过T4连接酶连接；

3）将上述构建载体转入菌株中进行诱导培养，而后纯化、透析、冻干，即得到重组CgC1qDC-3蛋白；

所述引物P1和P2分别为：

P1：5’- CGCGGATCCATTCCAATAAACACCATCTCC -3’；

P2：5’- CCGGAATTCTTAGGATAGTTTGAAGCCGGAG -3’。

3.按权利要求2所述的重组的长牡蛎CgC1qDC-3蛋白的应用，其特征在于：所述步骤2）原核表达载体为pET-30a (+)；菌株为大肠杆菌Transetta (DE3)。

4.按权利要求2所述的重组的长牡蛎CgC1qDC-3蛋白的应用，其特征在于：所述步骤3）经诱导培养后采用镍柱纯化获得可溶性重组蛋白，而后透析除盐、冻干。

5.按权利要求2所述的重组的长牡蛎CgC1qDC-3蛋白的应用，其特征在于：所述采用镍柱纯化过程：采用镍琼脂糖凝胶 FF装柱将经破碎后诱导培养物上柱，在以2 mL min^-1流速用TBS缓冲液平衡清洗2-5个床体积，再以流速为2 mL min^-1流速用含10 mM的咪唑的TBS缓冲液进行漂洗，收集洗脱峰流出液，最后以流速为1 mL min^-1流速用含250 mM的咪唑的TBS缓冲液进行洗脱，收集洗脱峰流出纯化蛋白。