[发明专利]一种用于检测谷胱甘肽的荧光探针及其制备方法和应用

说明书

本发明提供一种用于检测谷胱甘肽的荧光探针，所述荧光探针的结构式如下：其制备过程和后处理过程相对简单，有良好的选择性和较高的灵敏度，抗干扰能力强。此外，在待测溶液中加入本发明所述荧光探针后，用肉眼就可以观察到溶液的颜色变化。故而，本发明是一种简单，快速，灵敏的检测谷胱甘肽的荧光探针，在小分子检测领域具有广阔的应用前景。

技术领域

本发明属于荧光检测技术领域，具体涉及一种用于检测谷胱甘肽的荧光探针及其制备方法和应用。

背景技术

谷胱甘肽是一种具有重要生理功能的天然活性肽，它由谷氨酸、半胱氨酸及甘氨酸组成。谷胱甘肽在体内以两种形态存在，即还原型谷胱甘肽(GSH)和氧化型谷胱甘肽(GSSG)，在机体中大量存在并起主要作用的是还原型谷胱甘肽，通常所指的谷胱甘肽也是还原型谷胱甘肽。医学研究表明谷胱甘肽与很多疾病有关，比如肾功能衰竭、老年痴呆症等，它们在生物体内的含量变化可以作为这些疾病诊断的依据，开发选择性识别谷胱甘肽的检测方法显得尤为重要。

目前测定活性肽含量的方法有很多，如比色法、碘量法、酶循环法、毛细管电泳法和HPLC法等，这些方法各有优点，但也都有不足之处。

比色法是以生成有色化合物的显色反应为基础的，一般包括两个步骤：首先是选择适当的显色试剂与待测组分反应，形成有色化合物，然后再比较或测量有色化合物的颜色深度，在此过程中，溶液的酸度、显色剂的用量、温度、溶剂等对显色反应都有影响，测量的灵敏度和准确度较差；

碘量法是氧化还原滴定法中，应用比较广泛的一种方法，但对样品溶液的酸度和温度反应敏感，不易操作；

酶循环法是利用酶的底物特异性来放大被测物质的测定方法，但使用的工具酶用量大，成本较高；

毛细管电泳法是以弹性石英毛细管为分离通道，以高压直流电场为驱动力，依据样品中各组分之间淌度和分配行为上的差异而实现分离的电泳分离分析方法，毛细管直径小，使光路太短，灵敏度较低，而且电渗会因样品组成而变化，进而影响分离重现性；

HPLC法准确性高，样品处理简单，但受色谱柱局限，且耗费时间很长。

而荧光探针检测法以无损、可视化原位检测等优点备受研究者重视，但是能够与谷胱甘肽特异性响应的荧光探针尚未见报道。

发明内容

本发明针对现有技术中存在的问题，提供一种用于检测谷胱甘肽的荧光探针及其制备方法和应用。

本发明采用如下技术方案：

一种用于检测谷胱甘肽的荧光探针，所述荧光探针的结构式如下：

上述用于检测谷胱甘肽的荧光探针的制备方法，包括以下步骤：

(1)取4-溴-1,8-萘二甲酸酐与正丁胺反应得到N-正丁基-4-溴-1,8-萘二甲酰亚胺，其结构式如下：

(2)以铜盐作催化剂，将步骤(1)所得N-正丁基-4-溴-1,8-萘二甲酰亚胺与甲醇钠反应得到N-正丁基-4-甲氧基-1,8-萘二甲酰亚胺，其结构式如下：

(3)将步骤(2)所得N-正丁基-4-甲氧基-1,8-萘二甲酰亚胺与浓HBr反应得到N-正丁基-4-羟基-1,8-萘二甲酰亚胺，其结构式如下：

(4)取步骤(3)所得N-正丁基-4-羟基-1,8-萘二甲酰亚胺，依次加入4-二甲氨基吡啶和二环己基碳二亚胺，加入DS，反应后经后处理即得；

DS结构如下：