[发明专利]一种羊的长绒毛及其制备方法在审
申请号: | 201710285306.X | 申请日: | 2017-04-27 |
公开(公告)号: | CN107164385A | 公开(公告)日: | 2017-09-15 |
发明(设计)人: | 刘羿羿;张东;康利平;王丙萍;荆文魁;王峰;王申元;孟凡华;刘春霞;李璐;周欢敏 | 申请(专利权)人: | 内蒙古农业大学 |
主分类号: | C12N15/12 | 分类号: | C12N15/12;C12N15/85;C12N5/10;A01K67/027;C12Q1/68 |
代理公司: | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司23211 | 代理人: | 张勇 |
地址: | 010018 内蒙古自*** | 国省代码: | 内蒙古;15 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 种羊 绒毛 及其 制备 方法 | ||
1.一种碱基缺失的基因FGF5,其特征在于,基因cDNA序列如SEQ ID NO.1所示。
2.携带权利要求1所述基因的载体。
3.携带权利要求2所述载体的细胞系。
4.一种羊的长绒毛,其特征在于,将SEQ ID NO.2所示的FGF5基因改造为SEQ ID NO.1所示基因。
5.根据权利要求4所述的羊的长绒毛,其特征在于,以Talen为载体,将宿主细胞中SEQ ID NO.2所述基因改造为SEQ ID NO.1。
6.一种制备权利要求4或5所述羊的长绒毛的方法,其特征在于,构建无标记基因的载体,经过体细胞核移植,制备沉默SEQ ID NO.2所示FGF5基因的克隆羊,以获得的克隆羊生产长绒毛。
7.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,所述方法包括如下步骤:
(1)构建无标记基因和针对真核细胞的药物筛选标记基因的定点敲除载体;
(2)将该载体转染绒山羊成纤维细胞,挑选单个细胞扩大培养,酶切鉴定,测序分析筛选出阳性克隆;
(3)利用体细胞核移植技术将阳性细胞移植到去核卵细胞中,融合、激活、发育后移植到同期母羊体内相应部位;
(4)基因编辑绒山羊出生后在羊毛生长休止季节收集绒毛,检测绒毛长度。
8.一种筛选权利要求3所述细胞系的方法,其特征在于,构建无药物标记或荧光标记的载体,转染细胞后不通过添加药物和荧光照射来鉴别阳性细胞。
9.一种生产所述长绒羊毛的羊的制备方法,所述方法是通过基因编辑技术制备SEQ ID NO.2所示FGF5基因碱基缺失的基因编辑羊。
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