[发明专利]柴胡皂苷元A和D的制备方法及应用

权利要求书

1.柴胡皂苷元A和D的制备方法，其特征在于，步骤包括：

（1） 柴胡总皂苷溶液中加入复合植物水解酶，在pH=4.5～6的条件下，40～60℃反应15～30小时；复合植物水解酶为Viscozyme L；柴胡总皂苷与复合植物水解酶的用量比为1kg：2～15g；或者，以柴胡的原药重量计，与复合植物水解酶的用量比为1kg：0.1～1g；

（2） 步骤（1）的柴胡皂苷酶解液用有机溶剂萃取，合并萃取液并浓缩干燥，取固体；

（3） 步骤（2）的固体溶解于醇，制备液相色谱法分离，制备液相色谱分离条件为：采用C18柱，用乙腈-水作为流动相进行梯度洗脱，得到柴胡皂苷元A和柴胡皂苷元D。

2.权利要求1所述柴胡皂苷元A和D的制备方法，其特征在于，步骤（2）所述的有机溶剂为氯仿；步骤（3）所述的醇为甲醇。

3.权利要求1所述柴胡皂苷元A和D的制备方法，其特征在于，步骤（3）所述的梯度洗脱条件为：a.第一阶段时间18～25min，乙腈体积含量由30%～35%匀速变为62%～68%； b. 第二阶段时间8～12min，乙腈体积含量由62%～68%匀速变为30%～35%。

4.权利要求1所述柴胡皂苷元A和D的制备方法，其特征在于，步骤（3）所述的梯度洗脱条件为：第0～20min，乙腈体积含量由35%匀速变为66%；第20～30min，乙腈体积含量由66%匀速变为35%，收集洗脱段。

5.权利要求4所述柴胡皂苷元A和D的制备方法，其特征在于，第15～18min洗脱段为柴胡皂苷元D，第22～25min洗脱段为柴胡皂苷元A。

6.权利要求1所述柴胡皂苷元A和D的制备方法，其特征在于，步骤（1）中，柴胡总皂苷溶液的制备方法包括：柴胡粉碎后加入65%～85%乙醇，调节pH=7.5～8.5，70～85℃回流提取2～4次，每次乙醇与柴胡的用量比为8～15L:1kg；合并提取液，并去除乙醇。