[发明专利]柴胡皂苷元A和D的制备方法及应用

说明书

本发明属于医药领域，具体为酶水解柴胡皂苷制备柴胡皂苷元A和柴胡皂苷元D的工艺。柴胡皂苷元A和D的具体制备步骤包括：(1)柴胡总皂苷溶液中加入复合植物水解酶，在pH＝4.5～6的条件下，40～60℃反应15～30小时；(2)柴胡皂苷酶解液用有机溶剂萃取，合并萃取液并浓缩干燥，取固体；(3)固体溶解于醇，制备液相色谱法分离，得到柴胡皂苷元A和柴胡皂苷元D。该方法工艺稳定，产率提高；酶水解转化率高，产物纯度可达98％以上。柴胡皂苷元A和D对四种亚型的人乳腺癌细胞系均有抑制作用，可用于制备治疗乳腺癌的药物。

技术领域

本发明属于医药领域，具体是天然产物的制备及其应用。

背景技术

乳腺癌是威胁全球女性健康的常见恶性肿瘤，其发病率高居女性恶性肿瘤发病率之首(每十万人中约43.3人罹患乳腺癌)。统计显示，每年中国乳腺癌新发数量和死亡数量分别占全世界的12.2％和9.6％(L.Fan,K.Strasser-Weippl,J.J Li,et al.Breastcancer in China.Lancet Oncol.2014:15(7):e279-289.)。乳腺癌易产生化疗耐受，特别是多药耐受的问题一直是限制乳腺癌综合治疗疗效的瓶颈，严重降低了已发生乳腺癌转移患者的生存率和生存期。据统计，90％以上的转移性乳腺癌存在着不同程度的化疗耐受，一线化疗药物的首次有效率约为30-70％，且有效作用期仅持续6-10个月，但化疗药物依然是临床治疗乳腺癌的主力军(S.Braga.Clinical and Molecular Methods in DrugDevelopment:Neoadjuvant Systemic Therapy in Breast Cancer as a Model.MethodsMolBiol,2016,1395:251-280.C.Twelves,M.Jove,A.Gombos,et al.Cytotoxicchemotherapy:Still the mainstay of clinical practice for all subtypesmetastatic breast cancer.Crit Rev Oncol Hematol.2016,100:74-87.H.J Bowles,K.LClarke.)。近年来，临床用于转移性乳腺癌的靶向药物不断推陈出新，如2015年美国FDA批准的细胞周期蛋白依赖激酶(CDK)抑制剂Palbociclib成功上市，用于治疗HR+/HER2-(Luminal A型)绝经后晚期乳腺癌，但存在中性粒细胞缺乏、白血球减少、疲劳以及肺栓塞等副作用，并且价格昂贵。对于转移能力很强的HR-/PR-/HER2-(basal-like型)乳腺癌，2016年美国临床肿瘤学会年会报道：多种药物已处于III期临床研究阶段，至今仍未有药物上市。

化疗药物的耐受性以及靶向药物的局限性使得研究者们更加重视从天然活性产物中发现抗肿瘤前药，研发疗效强、毒副作用低的药物，以应对具有较强转移能力的恶性肿瘤。如以长春新碱、紫杉醇、鬼臼毒素、丹参内酯、姜黄素、桦木酸等天然活性成分为前药开发的抗肿瘤药物已广泛用于白血病、乳腺癌、前列腺癌和肺癌的临床治疗，为癌症患者带来治愈或者延长生存期的希望(H Itokawa,S.L Morris-Natschke,T.Akiyama,et al.Plant-derived natural product research aimed at new drug discovery.J Nat.Med.2008,62(3):263-280.)。