[发明专利]一种亚临界水萃取萝卜叶中山奈苷的方法

说明书

本发明公开了一种亚临界水萃取分离萝卜叶中山奈苷的方法。该方法以萝卜叶为原料，经亚临界水萃取、抽滤，减压浓缩、低温静置、离心、分离/富集、洗脱、馏分液低温静置、结晶和重结晶、干燥的步骤，得到山奈苷纯品。本发明方法可用于高纯度山奈苷的工业化生产，所用萝卜叶原料低廉易得，工艺流程简单，操作简便，成本低，无有毒有害试剂污染，可用于医药用原料药。

技术领域

本发明属于天然产物化学技术领域，具体涉及一种亚临界水萃取界萝卜叶中山奈苷的方法。

背景技术

亚临界水又称超加热水、高压热水或热液态水，是指在一定的压力下，将水加热到100℃以上临界温度374℃以下的高温，水体仍然保持在液体状态。亚临界状态下流体微观结构的氢键、离子水合、离子缔合、簇状结构等发生了变化，因此亚临界水与常温常压下的水在性质上有较大差别。亚临界状态下，随着温度的升高，水的极性可在较大范围内变化，水的极性可由强极性渐变为非极性，其性质更类似于有机溶剂，可将溶质按极性由高到低萃取出来。亚临界水萃取技术已成为食品、化工、中草药开发领域中最引人注目的技术，被迅速运用于食品添加剂、功能因子的制备和食品加工废弃物的回收再资源化。

山奈苷(kaempferitrin)，别名：山奈酚-3,7-O-L-二鼠李糖苷(kaempferol-3,7-L-

dirhamnoside)，分子式：C₂₇H₃₀O₁₄，分子量：578.57，据文献报道，山奈苷具有降血压、降血糖、抗疲劳、清热解毒、抗骨质疏松等药理活性。山柰苷的制备主要以伞形科植物柴胡或狭叶柴胡的干燥根为原料，经醇提后浓缩，采用柱层析分离纯化，冻干后得到相应的产品。中国专利CN201210382477、201410183257.5、200810068891.9、105732743A分别公开了从紫叶李树叶、山蚂蝗、槐角、阴香叶中分离提取山奈苷的方法。

萝卜叶是十字花科植物萝卜（Raphanus sativus L.）的根生叶，又称莱菔叶。萝卜是我国一种重要的蔬菜，全国各地均有种植，可四季栽培，全年供应，产销量很大。萝卜叶作为萝卜的副产品，资源也十分丰富。萝卜叶的营养成分丰富，美国公众科学中心将萝卜叶列于超级营养蔬菜第三名。同时，萝卜叶还具有很高的营养价值和药用价值。现代营养学研究表明，萝卜叶具有促进胃肠蠕动、治疗胃溃疡、抗氧化及降血压等多种生物活性。前期研究发现，萝卜叶中含有山奈苷组分，但目前尚未有从萝卜叶中提取分离山柰苷的文献报道和专利申请。本发明可进一步扩大萝卜叶的开发和利用，同时也为山奈苷的提取提供新资源和新方法，可产生良好的社会效益和可观的经济效益。

发明内容

本发明的目的是提供一种利用亚临界水萃取技术从萝卜叶中萃取山奈苷的方法。

本发明是通过如下技术方案实现的：一种亚临界水萃取萝卜叶中山奈苷的方法，按照下述步骤进行：

步骤1、以萝卜叶为原料，干燥后粉碎过20~200目筛；

步骤2、原料置于萃取釜中，用亚临界水对萝卜叶粉末进行萃取，经抽滤后，对滤渣重复萃取三次，合并提取液，减压浓缩至流浸膏；

步骤3、将步骤2所述浸膏上大孔吸附树脂层析柱进行初步分离，上样后，先用蒸馏水洗脱除去未吸附的水溶性杂质，再用一定体积分数的乙醇水溶液洗脱，收集有效馏分液；

步骤4、将上述有效馏分液置于低温条件下，使其析出结晶为山奈苷粗品；粗品再经重结晶、真空干燥后得山奈苷纯品。

步骤2中，所述萝卜叶与亚临界水的用量比为1g:10~50mL；所述萃取在亚临界萃取设备中进行，萃取温度为100~200℃，萃取时间为8~60min，压力为4~10MPa。