[发明专利]一种快速检测富贵竹炭疽病病原菌的方法及其应用

权利要求书

1.一种快速检测富贵竹炭疽病病原菌的方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）提取待测样品的总DNA；

（2）以总DNA为模板，以特异性引物ZM3-7F、特异性引物ZM3-7R为引物，对目的片段进行PCR扩增；

（3）将步骤（2）的扩增产物于1.2%琼脂糖凝胶中电泳检测，并分析结果；

所述特异性引物ZM3-7F序列如SEQ ID NO：1所示，特异性引物ZM3-7R序列如SEQ ID NO：2所示。

2.如权利要求1所述的快速检测富贵竹炭疽病病原菌的方法，其特征在于：所述步骤（2）中总DNA的最低检测浓度为10pg/μL；目的片段大小为468bp。

3.如权利要求1所述的快速检测富贵竹炭疽病病原菌的方法，其特征在于，所述步骤（2）中PCR反应体系为：10×PCR buffer 2.5μL，0.625U Taq 酶，dNTP Mixture 0.4mM，Mg²⁺3mM，5μmol的特异性引物ZM3-7F和5μmol的特异性引物各1μL，DNA模板1μL，ddH₂O补至25μL。

4.如权利要求1所述的快速检测富贵竹炭疽病病原菌的方法，其特征在于，所述步骤（2）中PCR反应程序为：95℃预变性3min，94℃变性45s、55℃退火30s、72℃延伸1min，共30个循环；72℃延伸7min，4℃保存。

5.如权利要求1或2或3或4所述的快速检测富贵竹炭疽病病原菌的方法，其特征在于：所述快速检测富贵竹炭疽病病原菌的方法作为及时快速检测富贵竹炭疽病病原菌、减轻病害损失的应用。