[发明专利]核酸分子检测方法及检测试剂盒在审
| 申请号： | 201710315401.X | 申请日： | 2017-05-08 |
| 公开（公告）号： | CN108531549A | 公开（公告）日： | 2018-09-14 |
| 发明（设计）人： | 邱全芊;陈泰龙;骆纪东 | 申请（专利权）人： | 长庚大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6816 | 分类号： | C12Q1/6816 |
| 代理公司： | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人： | 赵蓉民;张全信 |
| 地址： | 中国台湾桃园*** | 国省代码： | 中国台湾;71 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 核酸分子检测 寡核酸探针 荧光分子 寡核酸 染料 嵌合 双链 荧光淬灭分子 检测试剂 局部双链 目标核酸 荧光信号探测 荧光信号 第一端 试剂盒 嵌入 题目 激发 | ||
1.一种核酸分子检测方法，用以探测目标核酸，所述核酸分子检测方法包括下列步骤：
准备寡核酸探针以及双链嵌合染料，所述寡核酸探针包括寡核酸链、报道荧光分子与荧光淬灭分子，其中所述报道荧光分子连接于所述寡核酸链的第一端，且所述荧光淬灭分子连接于所述寡核酸链的相对于所述第一端的第二端；
使所述寡核酸探针结合至所述目标核酸，以形成局部双链结构；
所述双链嵌合染料嵌入至所述局部双链结构中，藉此所述双链嵌合染料激发所述报道荧光分子发出荧光信号；以及
根据所述荧光信号探测所述目标核酸。
2.如权利要求1所述的核酸分子检测方法，其中所述寡核酸探针未结合至所述目标核酸时，所述荧光淬灭分子吸收所述报道荧光分子发出的所述荧光信号。
3.如权利要求1所述的核酸分子检测方法，其中所述寡核酸链为寡肽核酸链、寡锁核酸链或寡核苷酸链。
4.如权利要求1所述的核酸分子检测方法，其中所述寡核酸链的长度为15单体单元至70单体单元。
5.如权利要求1所述的核酸分子检测方法，其中所述报道荧光分子选自HEX、Cy5、ROX、Bodipy 630/650与LCRed 640。
6.如权利要求1所述的核酸分子检测方法，其中所述荧光淬灭分子选自DABCYL、BHQ、Iowa Black、QSY与羧基四甲基罗丹明。
7.如权利要求1所述的核酸分子检测方法，其中所述双链嵌合染料选自SYBR Green I、SYBR Gold、LC Green及EvaGreen。
8.一种核酸分子检测试剂盒，用以探测目标核酸，所述核酸分子检测试剂盒包括：
双链嵌合染料；以及
寡核酸探针，所述寡核酸探针包括：
寡核酸链；
报道荧光分子连接于所述寡核酸链的第一端；以及
荧光淬灭分子连接于所述寡核酸链的相对于所述第一端的第二端，
其中所述双链嵌合染料嵌入至所述寡核酸探针结合至所述目标核酸后所形成的局部双链结构，并藉由所述双链嵌合染料激发所述报道荧光分子所发出的荧光信号来探测所述目标核酸。
9.如权利要求8所述的核酸分子检测试剂盒，其中所述寡核酸探针未结合至所述目标核酸时，所述荧光淬灭分子吸收所述报道荧光分子发出的所述荧光信号。
10.如权利要求8所述的核酸分子检测试剂盒，其中所述寡核酸链为寡肽核酸链、寡锁核酸链或寡核酸链。
11.如权利要求8所述的核酸分子检测试剂盒，其中所述寡核苷酸链的长度为15单体单元至70单体单元。
12.如权利要求8所述的核酸分子检测试剂盒，其中所述报道荧光分子选自HEX、Cy5、ROX、Bodipy 630/650与LCRed 640。
13.如权利要求8所述的核酸分子检测试剂盒，其中所述荧光淬灭分子选自DABCYL、BHQ、Iowa Black、QSY与羧基四甲基罗丹明。
14.如权利要求8所述的核酸分子检测试剂盒，其中所述双链嵌合染料选自SYBR GreenI、SYBR Gold、LC Green及EvaGreen。
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