[发明专利]一种肺炎支原体恒温检测试剂盒

权利要求书

1.一种肺炎支原体恒温检测试剂盒，包括反应液、启动液、反应酶系、上游引物和下游引物，其特征在于：所述的反应酶系的成分包括单链结合蛋白、重组酶、肺炎支原体特异性引物（上游引物和下游引物）等，其中，重组酶为不依赖于能量分子的重组酶。

2.根据权利要求1所述的一种肺炎支原体恒温检测试剂盒，其特征在于：其反应液成分包括：

Tris-缓冲液20mM-100mM

KCl20mM-80mM

(NH₄)₂SO₄ 0mM-100mM

甜菜碱 0M-2M

Triton X-100 0%-1%

PEG1%-20%

DMSO 0%-20%

BSA0mg/mL-1mg/mL 。

3.根据权利要求2所述的一种肺炎支原体恒温检测试剂盒，其特征在于：Tris-缓冲液可选自Tris-H₂SO₄、Tris-乙酸、Tris-HCl中的任意一种或多种，Tris-缓冲液的pH为7.0～9.0。

4.根据权利要求1所述的一种肺炎支原体恒温检测试剂盒，其特征在于：其启动液成分包括：

Mg²⁺ 5mM~20mM 。

5.根据权利要求4所述的一种肺炎支原体恒温检测试剂盒，其特征在于：Mg²⁺来自于硫酸镁、乙酸镁、氯化镁中的任意一种或多种。

6.根据权利要求1所述的一种肺炎支原体恒温检测试剂盒，其特征在于：其反应酶系成分包括：

dNTPs 150uM-500uM

聚合酶Bsu 10-100U

单链结合蛋白200-700ng/ul

重组酶（E.coli RecT） 100-500ng/ul

上游引物100-300nM

下游引物100-300nM。

7.根据权利要求1或6所述的一种肺炎支原体恒温检测试剂盒，其特征在于：所述的上游引物序列为：AGAACTTGAAGGTCAAGATGTTACTTGATCAAC；所述的下游引物序列为：GTTTTAGACCTAAATTTGCAAAACTTTCGTAAA。

8.根据权利要求1或6所述的一种肺炎支原体恒温检测试剂盒，其特征在于：重组酶选自E.coli RecT蛋白；λ噬菌体β蛋白；啤酒酵母SepΙ/STPβ；啤酒酵母DPA蛋白；啤酒酵母STPα蛋白；粟酒裂殖酵母p¹⁴⁰/Exoǁ蛋白以及RrpΙ、HPP-Ι、v-SEP、ICP8蛋白。

9.据权利要求1、2、4、6所述的一种肺炎支原体恒温检测试剂盒，其特征在于：恒温扩增的温度为35～42℃。