[发明专利]一种千年健指纹图谱的构建方法及其标准指纹图谱

说明书

本发明公开了一种千年健指纹图谱的构建方法及其标准指纹图谱。该构建方法包括以下步骤：S1：精密称取千年健粉末，加入甲醇后超声提取，静置冷却，用甲醇补足失重，离心，取上清液蒸发干燥，残渣加甲醇复溶，涡旋，过滤，取续滤液，即为供试品溶液；S2、吸取供试品溶液注入液相色谱仪，以高效液相色谱法采用梯度洗脱进行测定，得到千年健的指纹图谱。其中，高效液相色谱的色谱条件为：色谱柱的填料为十八烷基硅烷键合硅胶；流动相A为乙腈，流动相B为磷酸水溶液，流动相中A与B的体积比随时间逐渐增加；检测波长为285～305nm。本发明具有方法简便、稳定、精密度高、重现性好的特点，能够用于千年健药材的综合质量控制。

技术领域

本发明涉及中药指纹图谱的构建方法，特别涉及一种千年健指纹图谱的构建方法及其标准指纹图谱。

背景技术

中药指纹图谱特指某种中药材或中成药所共有的、具有特征性的某类或数类成分的色谱或光谱的图谱。中药指纹图谱作为一种综合的、可量化的质量控制手段，可提供比单一指标成分更全面的信息。目前，FDA、英国草药典、印度草药典、德国药用植物学会、加拿大药用植物学会等均接受指纹图谱的质控方法，中国药品监督管理局也颁布了《中药注射剂指纹图谱研究的技术要求(暂行)》。在现阶段中药有效成分绝大多数没有明确的情况下，中药指纹图谱对于有效控制和评价中药材或中成药的质量具有重要的意义。中药指纹图谱技术已经成为牵动行业全面进步、带动中药现代化、推动中药走向世界的关键技术之一。

千年健为天南星科植物千年健Homalomena occulta(Lour.)Schott的干燥根茎，又名千颗针、丝棱线。产于广西、云南等地，具有祛风湿，壮筋骨之功效，临床常用于治疗风湿性关节炎，类风湿性关节炎。千年健含大量挥发油成分，2015年版中国药典一部规定用千年健中含芳樟醇的含量(不少于0.2％)来控制千年健药材的质量，但此单指标成分的质量控制不能全面的评价药材的优劣。中药指纹图谱是控制天然药物质量的有效方式之一。指纹图谱全面整体地反映了药材的内在质量，能为中药的质量评价和控制提供一个有效的参考方法。全面、系统而又特征地指纹图谱有利于全方位地控制中药质量并与国际接轨。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术中所存在的上述不足，提供一种符合千年健药材特点的指纹图谱构建方法。该指纹图谱构建方法前处理简单，所得图谱中各峰分离度佳，构成了千年健药材的指纹特征，可作为千年健药材的标准指纹图谱。

为了实现上述发明目的，本发明提供了以下技术方案：

一种千年健指纹图谱的构建方法，包括以下步骤：

S1、供试品溶液的制备：精密称取千年健粉末，加入甲醇后超声提取，静置冷却，用甲醇补足失重，离心，取上清液蒸发干燥，残渣加甲醇复溶，涡旋，过滤，取续滤液，所得溶液即为供试品溶液；

S2、供试品溶液的测定：吸取供试品溶液注入液相色谱仪，以高效液相色谱法采用梯度洗脱进行测定，得到千年健的指纹图谱；

其中，高效液相色谱的色谱条件为：色谱柱的填料为十八烷基硅烷键合硅胶；流动相A为乙腈，流动相B为磷酸水溶液，流动相中A与B的体积比随时间逐渐增加；检测波长为285～305nm；

梯度洗脱的程序是：

0～10分钟时，流动相A∶流动相B＝2.5:97.5；

10～20分钟时，流动相A∶流动相B＝2.5：97.5～3：97；

20～35分钟时，流动相A∶流动相B＝3：97～5：95；

35～40分钟时，流动相A∶流动相B＝5：95～8：92；

40～50分钟时，流动相A∶流动相B＝8：92～10∶90；

50～60分钟时，流动相A∶流动相B＝10∶90～14：86；