[发明专利]一种人体细胞瓦博格效应简易检测试剂及其制备方法和应用有效
| 申请号： | 201710329253.7 | 申请日： | 2017-05-11 |
| 公开（公告）号： | CN107132218B | 公开（公告）日： | 2019-11-08 |
| 发明（设计）人： | 郑德春 | 申请（专利权）人： | 山东天倪生物技术有限公司 |
| 主分类号： | G01N21/78 | 分类号： | G01N21/78 |
| 代理公司： | 济南泉城专利商标事务所 37218 | 代理人： | 李桂存 |
| 地址： | 250000 山东省济南市高新区综合*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 简易检测 人体细胞 博格 制备方法和应用 检测 细胞 癌变细胞 辐射危害 结肠粘膜 口腔粘膜 脱落细胞 运营成本 活性氧 血红素 筛查 样本 游离 采集 皮肤 | ||
1.一种人体细胞瓦博格效应的简易检测试剂，其特征在于，由试剂A、试剂B、试剂C和试剂D组成；其中，
试剂A为4-6 % w.t的枯草杆菌蛋白酶等渗溶液；
试剂B为pH 3.6-6.0醋酸盐缓冲液；
试剂C由0.1 g/L-0.25 g/L的3,3’,5,5’-四甲基联苯胺溶液、1.0 mL/L-2.5 mL/L的6-甲氧基喹啉溶液和2-5mL/L的过氧化羟基异丙苯溶液组成；
试剂D由0.03-0.07 % w.t甲苯胺蓝O溶液、2.5-7.5 mL/L的曲拉通X-100溶液组成；
所述试剂A、试剂B、试剂C和试剂D的体积比为2:1:1:1。
2.根据权利要求1所述的简易检测试剂，其特征在于，
所述试剂A枯草杆菌蛋白酶的浓度为5 %w.t；
所述试剂B醋酸盐缓冲液的浓度为2 mol/L，pH为5.0；
所述试剂C的3,3’,5,5’-四甲基联苯胺浓度为0.15 g/L，6-甲氧基喹啉浓度为1.25mL/L，过氧化羟基异丙苯浓度为2.5 mL/L；
所述试剂D的甲苯胺蓝O浓度为0.05 %w.t，曲拉通X-100浓度为5 mL/L。
3.根据权利要求1所述的简易检测试剂，其特征在于，所述人体细胞的采集部位包括结肠粘膜，皮肤，外阴和口腔粘膜。
4.一种如权利要求1或2所述的简易检测试剂在检测人体细胞瓦博格效应的应用，其特征在于，包括以下步骤：
（1）将人体细胞置于试剂A中制成样本液；
（2）将步骤（1）的样本液离心；
（3）取步骤（2）的上清液，先加入试剂B混匀，再加入试剂C，以比色法测定细胞游离原血红素含量：若不变色为阴性，浅蓝色为弱阳性，蓝色为阳性，深蓝色为强阳性；
（4）取步骤（2）的沉淀物，加入试剂D以比色法测定体脱落细胞的活性氧含量：若蓝色不变色为阴性，蓝色变为浅蓝色为阳性，变为无色为强阳性。
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