[发明专利]一种人体细胞瓦博格效应简易检测试剂及其制备方法和应用

说明书

本发明为解决PET‑CT运营成本高、对人体有较重的辐射危害及无简便筛查检测早期癌变细胞试剂的问题，提供了一种可快速准确对人体细胞瓦博格效应进行简易检测的试剂及其制备方法和应用。所述简易检测试剂，由试剂A、试剂B、试剂C和试剂D组成；人体细胞采集部位包括结肠粘膜、皮肤、外阴、口腔粘膜。本发明的试剂可以检测脱落细胞样本中细胞游离原血红素和活性氧强度，检测细胞有无瓦博格效应。

技术领域

本发明涉及一种人体细胞瓦博格效应简易检测试剂及其制备方法和应用，属于医学检验领域。

背景技术

随着人们生活质量的提高，癌症的发病率逐年增加。近几年来，全球新增的恶性肿瘤病例逐年上升，每年全球因恶性肿瘤死亡的人数将近千万人。结直肠癌、体表恶性肿瘤及口腔癌是近年危害较大、发病率比较高且治愈较为困难的几种癌症。

全球每年新发结直肠癌病人高达93万，在我国每年新发病例高达13-16万人，在消化道肿瘤中结直肠癌的发病率仅次于胃癌；在我国目前结直肠癌患病率已经高达46.8/10万；已经成为中国三大癌症之一。但是大部分患者发现时已是晚期，失去了最佳的治疗时机，导致结直肠癌患者确诊后5年生存率很低；在我国每5分钟就有1人死于结直肠癌。以往结直肠癌的筛查方法主要有肛门指捡和大便隐血试验。此方法简便易行，但前者阳性征象出现较晚，后者缺乏特异性。血清癌胚抗原（CEA）检查亦不具有特异性的诊断价值，不适合作为普查或早期诊断。内镜检查、直肠内超声显象、双重对比造影、CT和磁共振检查都不能作为早期诊断的方法。

体表恶性肿瘤泛指位居身体表面的恶性肿瘤，含皮肤恶性肿瘤、会阴癌等。皮肤恶性肿瘤，根据肿瘤细胞的来源不同而有不同的命名，包括表皮、皮肤附属器、皮肤软组织、周围神经、黑素细胞、皮肤淋巴网状组织和造血组织等。外阴部恶性肿瘤女性以外阴癌和阴道癌为多；男性主要是阴茎癌。体表恶性肿瘤的诊断主要应用细胞学检查。目前临床尚无便捷、快速、无创、经济、准确的简易诊断方法。

相比其他部位的癌症，口腔癌更易转移、治疗花费大、预后差，目前只有60%的口腔癌患者能活到5年以上（5年生存率在60%左右），严重威胁着人们的健康，甚至生命。因此，口腔癌的预防就显得十分重要，从早期发现入手，口腔癌是可以预防的。既往口腔癌的筛查方法主要依赖肿瘤标志物癌胚抗原（CEA）检查，但特异性很差。CT检查和细胞学检查不适于筛查或早期诊断。

研究发现，人体细胞在癌变早期会出现糖代谢异常，癌细胞的耗糖量是正常细胞的十倍，但是其产生的能量只是正常细胞的十分之一，而且磷酸戊糖途径代谢模式活跃，这种异常称为瓦博格效应。目前，癌症细胞的瓦博格效应可由PET-CT（正电子发射计算机断层显像）检测获得。但是，PET-CT运营成本相当高，全身检查一次，辐射量相当于一个正常人30年的辐射在一小时内接受。因此，开发新的能够简便准确检测早期癌变细胞的试剂具有重要现实意义。

发明内容

为解决PET-CT运营成本高、对人体有较重的辐射危害及无简便筛查检测早期癌变细胞试剂的问题，本发明提供了一种可快速准确对人体细胞瓦博格效应进行简易检测的试剂。

本发明的另一目的是提供一种人体细胞瓦博格效应简易检测试剂的制备方法。

本发明的再一目的是提供一种体细胞瓦博格效应简易检测试剂在检测体细胞瓦博格效应的应用。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案。

一种人体细胞瓦博格效应的简易检测试剂，由试剂A、试剂B、试剂C和试剂D组成；

其中，

试剂A为4-6 %w.t的枯草杆菌蛋白酶等渗溶液；

试剂B为pH 3.6-6.0的醋酸盐缓冲液；