[发明专利]一种洛度沙胺氨丁三醇有关物质的HPLC分析检测方法

说明书

本发明属于分析方法技术领域，具体公开了一种洛度沙胺氨丁三醇有关物质检测的高效液相色谱分析法，分离并检测洛度沙胺氨丁三醇原料药或制剂中6个杂质。本发明方法首次在流动相中创造性地加入胺类物质，彻底解决了主峰与杂质峰、杂质峰与辅料峰之间的分离难题，操作简单、灵敏度高。大大提高了现有方法的专属性，为含洛度沙胺氨丁三醇制剂的安全性的研究提供了更为有效的依据。

技术领域

本发明涉及分析方法技术领域，具体涉及一种洛度沙胺氨丁三醇有关物质检测的高效液 相色谱分析法，分离并检测洛度沙胺氨丁三醇原料药或制剂中6个杂质。

背景技术

洛度沙胺氨丁三醇，其化学结构式为：

主要用于眼科疾病局部治疗，如春季卡他性角膜炎、卡他性结膜炎等。由洛度沙胺氨丁 三醇制得的滴眼液已经在中国批准上市，商品名为

本申请发明人在对洛度沙胺氨丁三醇原料药进行研究的过程中发现，其存在6个可能由 工艺过程、起始物料或降解反应引入的杂质，杂质信息如下表A所示。

表A 洛度沙胺氨丁三醇杂质信息表

然而，关于洛度沙胺氨丁三醇有关物质的研究鲜有报道。目前美国药典、英国药典、日 本药局方和2015年中国药典中均未收载洛度沙胺氨丁三醇原料及制剂的质量标准。洛度沙 胺滴眼液原研制剂厂家的进口注册标准JX19980121中亦未对有关物质进行研究。经调研， 仅洛度沙胺氨丁三醇原料药标准YBH20722004和洛度沙胺滴眼液进口注册标准YBH19932004对洛度沙胺滴眼液中的有关物质进行了研究，两者采用的方法相同。

本申请发明人研究发现采用洛度沙胺氨丁三醇原料药标准YBH20722004中的方法并不 能对上述6种已知杂质实现基线分离，在该方法基础上对色谱参数进行调整后，6种已知杂 质仍不能实现基线分离。同时该方法条件下，杂质A出峰较快，与洛度沙胺滴眼液中辅料 依地酸二钠、柠檬酸钠、柠檬酸(公布的原研处方中辅料包括依地酸二钠、苯扎氯铵、甘露醇、柠檬酸、柠檬酸钠、羟丙甲纤维素、四丁酚醛)重叠在一起，干扰杂质A的 测定。

发明内容

为解决上述问题，本发明提供了一种同时检测洛度沙胺氨丁三醇原料药或制剂中6种已 知杂质的高效液相色谱检测方法。

所述方法包括：

反相色谱柱的填充剂为烷基键合硅胶；以胺类物质的水溶液-有机溶剂为流动相，所述 有机溶剂为甲醇和/或乙腈；采用梯度洗脱，流速为0.8ml/min～1.2ml/min；柱温为25～45℃； 检测波长为240～250nm；

所述的反相色谱柱的填充剂为十八烷基硅烷键合硅胶或辛烷基硅烷键合硅胶，优选为十 八烷基硅烷键合硅胶。

所述的反相色谱柱的规格为250×4.6mm，5μm。

所述的胺类物质为二乙胺和/或三乙胺，优选为三乙胺。

所述三乙胺的水溶液pH为5.0～8.0，优选为6.0～7.0，更优为6.8。

所述pH调节剂为磷酸、醋酸和甲酸，优选为磷酸。

所述三乙胺的水溶液中三乙胺的浓度为0.05v/v％-0.2v/v％，优选为0.1v/v％。

所述的有机溶剂优选为甲醇。

所述的梯度洗脱程序为：

与现有技术相比，本发明的优点和有益效果如下：