[发明专利]具有抑制肿瘤功能的PEG化多肽及其制备方法与应用

说明书

本发明公开了具有抑制肿瘤功能的PEG化多肽及其制备方法与应用。本发明公开的PEG化多肽为利用PEG修饰名称为PIBC的多肽得到的PEG化多肽，该修饰通过利用化合物甲与化合物乙进行Michael加成反应形成碳硫单键实现，化合物甲为一端修饰有马来酰亚胺的PEG，化合物乙为N端或C端引入含有巯基的半胱氨酸残基的PIBC，PIBC为序列表中SEQ ID No.1所示多肽，SEQ ID NO.1的第1位为PIBC的N端氨基酸残基；Michael加成反应发生在马来酰亚胺与巯基间。本发明的PEG化多肽在保留了PIBC抑制热休克蛋白gp96活性的同时，延长了PIBC的体内半衰期，具有潜在的新药开发价值。

技术领域

本发明涉及生物技术领域中，具有抑制肿瘤功能的PEG化多肽及其制备方法与应用。

背景技术

根据全国肿瘤登记中心发表的《2015中国癌症统计数据报告》显示，乳腺癌是中国女性发病率最高的癌症类型，其发病率正以每年3％的速度递增，成为城市中死亡率增长最快的癌症。目前乳腺癌主要治疗方法包括手术、化疗、内分泌以及靶向治疗。靶向治疗具有定位准确，针对性强，毒副反应小等特点，能够明显地延长患者的生存期，提高患者的生存质量，尤其适于晚期病人或无法耐受放、化疗的患者。现有的乳腺癌的靶向治疗主要针对的是HER2阳性乳腺癌，其靶向药物Trastuzumab(即赫塞汀)是一种人源化的HER2单克隆抗体，对HER2基因扩增和过表达的乳腺癌病人，trastuzumab单独应用或与其它药物联合应用有效率可分别达到25％或50％，赫塞汀目前已成为乳腺癌等治疗的一线药物，销售额位居肿瘤生物治疗药物前列。而HER2阳性的乳腺癌患者仅占乳腺癌患者总数的20％左右，因此急需寻找新的乳腺癌靶点，开发出更为广谱的抗乳腺癌靶向药物。

热休克蛋白gp96属于HSP90家族的成员，在正常生理条件下定位于细胞内质网中，与细胞质HSP90高度同源。与其它热休克蛋白一样，gp96的主要生物学功能是分子伴侣。它参与新生蛋白的折叠，转运，降解及多聚体的组装，抑制错误折叠蛋白的分泌等。与其他分子伴侣不同，gp96能结合的蛋白、多肽链种类有限，更具选择性。目前已经报道的已有20多种蛋白的成熟需要gp96的参与，这些研究揭示gp96作为分子伴侣的调控作用，与多个客户蛋白形成蛋白质复合物，其介导的调控网络对于多个肿瘤蛋白发挥功能至关重要。除了定位于内质网中，gp96蛋白还存在于某些细胞表面。越来越多的研究发现，gp96在多种癌细胞的膜表面有过表达现象，暗示着其与癌症的发生发展存在某种联系。孟颂东等研究发现内质网中的gp96位移至细胞膜上发挥核心脚手架蛋白的调控作用，与多个客户蛋白形成蛋白质机器复合物，对于多个肿瘤蛋白发挥功能至关重要，与乳腺癌的恶性程度与不良预后密切相关。细胞膜上gp96可能是乳腺癌治疗的新靶点。

中国专利ZL 201110159487.4基于热休克蛋白gp96氨基酸序列及空间构象，通过一系列技术分析和手段，设计开发含有α-螺旋序列的多肽PIBC(Peptide Inhibitor forBreast Cancer)，该多肽能与热休克蛋白gp96结合，干扰gp96与肿瘤相关受体HER-2的相互作用并降低其稳定性、促进HER-2在肿瘤细胞中的降解，该多肽能够降低乳腺癌患者的肿瘤组织中HER2、uPAR、ER-a36的蛋白含量，从而实现抗乳腺癌的临床疗效。

虽然多肽类药物的作用位点专一、疗效确切，但溶解度低、免疫原性高、易被蛋白酶降解和被肾脏清除等缺陷严重地制约了其临床应用。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是如何抑制肿瘤，尤其是乳腺癌肿瘤。

为解决上述技术问题，本发明首先提供了具有抑制肿瘤功能的PEG化多肽。

本发明所提供的PEG化多肽，为利用PEG修饰名称为PIBC的多肽得到的化合物；