[发明专利]鉴定淮麦33小麦品种的方法

说明书

本发明属于小麦种质资源品种鉴定技术领域，具体涉及一种常规小麦品种淮麦33的鉴定方法。利用SSR标记技术，通过对分布于小麦21条染色体上的800对SSR引物进行筛选，确认barc45和wmc382号引物针对淮麦33品种具有较好的特异性，用于淮麦33品种的鉴定。本发明需用检测样品量少，方法成熟，准确度高，应用到市场上对淮麦33品种进行真伪鉴定，有利于新品种的推广和种质资源保护。

技术领域

本发明属于小麦种质资源品种鉴定技术领域， 具体涉及一种鉴定淮麦33小麦品种的方法。

背景技术

小麦（Triticum aestivum L.）是我国最重要的粮食作物之一，常年种植面积3.6亿亩左右。随着种子商业化水平的提高及优良新品种的不断出现，我国小麦品种更新换代越来越快。而且随着我国农村土地流转速度加快，农民购买良种率也在不断提高，年需求小麦良种约50亿斤。商业价值的存在致使很多种子企业开始经营小麦良种，而没有品种权的企业为获得高额利润，品种假包装、套牌等违法行为在市场上时有发生，伪劣假冒种子伤害农民的现象也屡次出现，一定程度上影响农民购买良种的意愿，也侵犯了正规企业的合法权益，遏制了育种家育种创新的动力，影响我国小麦种子产业的健康稳定发展。为保护小麦新品种权，给维权打假工作提供有效证据，亟待需要准确、快速、稳定的品种鉴定方法。

通过对小麦籽粒、幼苗和植株等传统的形态鉴定需要经验丰富的专家进行，而且往往存在鉴定时间长，易受人为主观因素影响等问题，法院不宜采用；采用苯酚染色法、氢氧化纳测定等化学鉴定手段易受种子发育程度、环境条件等制约，鉴定准确度不高；采用酸性聚丙烯酰胺凝胶电泳等蛋白标记技术往往存在条带较多，结果不易判定，且难以对亲缘关系较近的品种进行鉴定；采用单个品种的全基因组测序往往存在技术复杂、费用昂贵等诸多问题。上述技术存在的缺陷使其难以作为针对不同小麦品种统一的鉴定手段。

目前，分子标记（包括RAPD、RFLP、SSR和KASP）技术在小麦基因组的研究中得到了广泛应用。与其它分子标记相比，SSR标记主要具备以下优点：（1）标记数量丰富，具有较多的等位变异，广泛分布于各条染色体上；（2）是共显性标记，呈孟德尔遗传；（3）技术重复性好，易于操作，结果可靠。目前已广泛应用于小麦遗传连锁图谱的构建、目的基因的标记和定位、染色体片段的鉴定、遗传多样性分析和标记辅助选择等方面。因此，根据分子标记的技术特点，利用分子标记技术筛选出1个或几个特异引物，且这些引物能够真实反应该品种的基因型信息，即可将这些特异引物用于该小麦品种的鉴定工作。采用该技术可为小麦品种的维权打假工作提供有效证据，有利于相关品种保护工作的开展。

发明内容

本发明的目的是：提供一种鉴定淮麦33小麦品种的方法，利用SSR标记技术，采用能够较好表达黄淮麦区小麦品种的特异性引物barc45和wmc382，通过这两对引物为淮麦33小麦品种提供快速、准确的鉴定方法。

本发明的技术解决方案是：利用SSR标记技术，通过对分布于小麦21条染色体上的800对SSR引物进行筛选，确认barc45和wmc382号引物针对淮麦33品种具有较好的特异性，用于淮麦33品种的鉴定；该鉴定方法包括以下步骤：

（1）采用CTAB法，分别对淮麦33小麦品种和待测小麦品种的任何器官或组织提取DNA；

（2）以步骤（1）提取的淮麦33小麦品种和待测小麦品种的DNA为模板，以barc45 和wmc382为引物序列，分别进行PCR扩增；所述barc45 和wmc382为引物序列对应如下表所述：