[发明专利]一种烟草黑胫病菌发酵液致病活性成分及其制备方法

权利要求书

1.一种烟草黑胫病菌发酵液致病活性组分的制备方法，其特征在于，步骤包括：

（1）黑胫病菌菌丝在马铃薯液体培养基中摇床振荡培养；第5d-7d收集无菌发酵液，离心，将上清液过滤除菌，待用；

（2）将步骤（1）得到的除菌后的黑胫病菌无菌发酵液通过5KDa微滤中空纤维素膜和3KDa超滤中空纤维素膜进行膜过滤分离，得到澄清透明的超滤液；将超滤液上柱进行大孔吸附树脂富集后用80-95%的乙醇将树脂上吸附的成分冲下，得到80-95%乙醇洗脱液，即黑胫病菌发酵液致病活性组分。

2.根据权利要求1所述的烟草黑胫病菌发酵液致病活性组分的制备方法，其特征在于，

步骤（1）中的摇床培养条件：26-30℃、180-250rpm。

3.根据权利要求1所述的烟草黑胫病菌发酵液致病活性组分的制备方法，其特征在于，

步骤（1）中的摇床培养条件：28℃,220 rpm。

4.根据权利要求1所述的烟草黑胫病菌发酵液致病活性组分的制备方法，其特征在于，

步骤（1）中4℃、6000-10000rpm离心10-20min，将上清液经0.22um细菌过滤器过滤除菌，保存于4℃冰箱中待用。

5.根据权利要求4所述的烟草黑胫病菌发酵液致病活性组分的制备方法，其特征在于，

步骤（1）中8000 rpm离心15min。

6.根据权利要求1所述的烟草黑胫病菌发酵液致病活性组分的制备方法，其特征在于，

步骤（2）中采用的是D101型大孔吸附树脂。

7.根据权利要求1所述的烟草黑胫病菌发酵液致病活性组分的制备方法，其特征在于，

步骤（2）中采用的乙醇浓度是95%。

8.一种烟草黑胫病菌发酵液致病活性组分，其特征在于，是由权利要求1-7任一项所述的方法制备而成的。