[发明专利]新的赖氨酸脱羧酶突变体及其应用

权利要求书

1.一种赖氨酸脱羧酶，所述赖氨酸脱羧酶是：

(a)其氨基酸序列由SEQ ID NO:1所示序列突变而来，在以下氨基酸残基位点发生突变：

176位的氨基酸残基突变为Val；或者

176位的氨基酸残基突变为Val和88位的氨基酸残基突变为Ser；或者

176位的氨基酸残基突变为Val和230位的氨基酸残基突变为His；或者

176位的氨基酸残基突变为Val、230位的氨基酸残基突变为His和9位的氨基酸残基突变为Arg；或者

176位的氨基酸残基突变为Val、230位的氨基酸残基突变为His和111位的氨基酸残基突变为Gly；或者

176位的氨基酸残基突变为Val、230位的氨基酸残基突变为His和44位的氨基酸残基突变为Arg；

或

(b)所述赖氨酸脱羧酶由在(a)所述的氨基酸序列的C末端添加6个His氨基酸残基而形成，并且具有(a)所述赖氨酸脱羧酶的功能。

2.一种表达载体，所述表达载体包含权利要求1所述的赖氨酸脱羧酶的编码序列。

3.一种宿主细胞，所述宿主细胞包含权利要求2所述的表达载体或者其基因组中整合有权利要求1所述的赖氨酸脱羧酶的编码序列。

4.如权利要求3所述的宿主细胞，其特征在于，所述宿主细胞是细菌。

5.如权利要求4所述的宿主细胞，其特征在于，所述宿主细胞是大肠杆菌(E.coli)、谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)、蜂房哈夫尼菌(Hafnia alvei)或枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。

6.如权利要求5所述的宿主细胞，其特征在于，所述宿主细胞是大肠杆菌(E.coli)。

7.一种生产1,5-戊二胺的方法，所述方法包括：

(1)利用权利要求1所述的赖氨酸脱羧酶或者权利要求3-6中任一项所述的宿主细胞生产1,5-戊二胺；和

(2)从(1)的体系中分离得到1,5-戊二胺。

8.权利要求1所述的赖氨酸脱羧酶或者权利要求2所述的表达载体或者权利要求3-6中任一项所述的宿主细胞在生产1,5-戊二胺中的应用。